2) изменение физического состояния матрицы
3) изменение температуры
4) аналоги, метаболиты, либо иные не являющиеся объектом исследования вещества, которые могут присутствовать в матрице (+)
Перекрёстной реактивностью называют способность аналитической системы реагировать не только с целевым веществом, но и с химически сходными соединениями, которые не являются объектом исследования. В судебно-химическом анализе это особенно характерно для иммунологических методов: антитела распознают определённые структурные фрагменты молекулы, поэтому могут связывать аналоги, метаболиты, лекарственные средства или другие компоненты биологической матрицы.
Такая реакция способна вызвать ложноположительный результат либо завышение измеряемой концентрации целевого вещества. Вероятность перекрёстной реактивности зависит от химического строения интерферента, его концентрации, специфичности антител и состава матрицы — крови, мочи, слюны или другого биологического материала. Изменение температуры, давления или физического состояния образца относится к условиям проведения анализа и само по себе не является перекрёстной реактивностью.
Положительный результат скринингового исследования при наличии возможной перекрёстной реакции не следует рассматривать как окончательное доказательство присутствия конкретного вещества. Для подтверждения применяют высокоспецифичные методы, прежде всего газовую или жидкостную хроматографию с масс-спектрометрическим детектированием, позволяющие идентифицировать соединение по совокупности характеристик.
| Фактор или соединение | Механизм | Возможное влияние на результат | Тактика интерпретации |
|---|---|---|---|
| Целевой аналит | Специфическое связывание с реагентом или обнаружение по аналитическим характеристикам | Истинноположительный результат | Оценивают совместно с калибровкой, контролями и клинико-экспертными данными |
| Структурный аналог | Частичное совпадение молекулярных фрагментов с целевым веществом | Ложноположительный сигнал или завышение концентрации | Требуется подтверждение методом с иной аналитической специфичностью |
| Метаболит целевого или родственного вещества | Сохранение эпитопа либо сходной химической группы, распознаваемой антителом | Сигнал может ошибочно быть отнесён к исходному соединению | Учитывают метаболический профиль и сроки образования метаболитов |
| Лекарственный препарат или его метаболит | Неспецифическое взаимодействие с реагентом вследствие структурного сходства | Имитация присутствия другого класса веществ | Изучают сведения о назначенных препаратах и проводят подтверждающий анализ |
| Эндогенное вещество матрицы | Связывание с реагентом или влияние на химическую реакцию обнаружения | Фоновый или неспецифический сигнал | Используют холостые матрицы, контрольные образцы и валидированные методики |
| Матричный эффект | Изменение экстракции, ионизации или детектирования компонентами образца | Подавление либо усиление сигнала, но не классическая перекрёстная реактивность | Оценивают отдельно при валидации метода |
| Подтверждающий хромато-масс-спектрометрический анализ | Разделение веществ и идентификация по времени удерживания и масс-спектру | Существенное снижение риска ошибочной идентификации | Используют для окончательного экспертного вывода о наличии вещества |
В экспертной практике перекрёстная реактивность является показателем ограниченной аналитической специфичности метода. Особенно важна она при интерпретации иммунологических скринингов, которые предназначены для предварительного обнаружения групп соединений. Результат должен оцениваться с учётом пределов обнаружения, перечня потенциальных интерферентов и данных валидации методики. Окончательный вывод формулируют только после подтверждения идентичности вещества и исключения значимых альтернативных объяснений сигнала.