2) водным раствором серной кислоты
3) нейтральным ацетоном
4) этанолом, подкисленным щавелевой кислотой
Метод П. Валова является частным способом изолирования барбитуратов из трупного и другого биологического материала. На первом этапе измельчённый объект настаивают с водой, подщелоченной раствором гидроксида натрия до pH не менее 10. В щелочной среде барбитураты, обладающие свойствами слабых кислот вследствие наличия подвижного водорода в имидной группе, диссоциируют и образуют водорастворимые натриевые соли.
Переход барбитуратов в ионизированную форму повышает их извлечение из тканей в водную фазу. После отделения твёрдых частиц извлечение обрабатывают вольфраматом натрия и подкисляют: при этом осаждаются белки и часть других матричных компонентов, а барбитураты вновь переходят в преимущественно неионизированную молекулярную форму. В кислой среде они лучше экстрагируются диэтиловым эфиром, что позволяет получить концентрированное извлечение для последующего хроматографического или спектрального исследования.
Серная кислота на начальном этапе применяется в других схемах, в частности при изолировании алкалоидов по В. Ф. Крамаренко. Подкисленный этанол характерен для классических общих методов выделения нелетучих органических ядов, тогда как нейтральный ацетон не обеспечивает селективного превращения барбитуратов в водорастворимые соли. Следовательно, выбор гидроксида натрия определяется кислотно-основными свойствами целевой группы веществ.
| Этап или подход | Химическая среда | Основной результат | Экспертное значение |
|---|---|---|---|
| Первичное настаивание по П. Валову | Вода с гидроксидом натрия, pH ≥ 10 | Образование водорастворимых солей барбитуратов | Обеспечивает их переход из тканей в водную фазу |
| Отделение биоматериала | Центрифугирование или фильтрование | Удаление крупных тканевых частиц | Получение водного извлечения для дальнейшей очистки |
| Очистка извлечения | Вольфрамат натрия и кислая среда | Осаждение белков и сопутствующих матричных веществ | Снижает влияние биологических примесей на анализ |
| Подкисление | Среда около pH 2 | Переход барбитуратов в молекулярную форму | Создаёт условия для экстракции органическим растворителем |
| Органическая экстракция | Диэтиловый эфир | Концентрирование неионизированных барбитуратов | Получение фракции для идентификации и количественного определения |
| Метод В. Ф. Крамаренко | Вода, подкисленная серной кислотой | Перевод алкалоидов в водорастворимые соли | Предназначен преимущественно для веществ основного характера |
| Подкисленный этанол | Этанол с органической кислотой | Общее извлечение ряда нелетучих органических ядов | Менее селективен по отношению к барбитуратам, чем метод Валова |
Полученное извлечение не считается достаточным доказательством наличия конкретного барбитурата без подтверждающего исследования. Идентификацию проводят с применением тонкослойной, газовой или высокоэффективной жидкостной хроматографии, при необходимости сочетая их с масс-спектрометрией. Количественный результат оценивают с учётом распределения вещества в органах, посмертных изменений и сведений о проведённой терапии. Судебно-экспертный вывод формулируют на основании совокупности химико-токсикологических, морфологических и обстоятельственных данных.