2) способность методики сохранять свои характеристики при небольших изменениях в условиях испытаний
3) способность аналитической методики достоверно определять анализируемое вещество в присутствии других компонентов (+)
4) степень близости между серией измерений, при анализе однородного образца в определенных условиях
Специфичность аналитической методики — это её способность достоверно идентифицировать и количественно определять целевой аналит в присутствии компонентов матрицы и посторонних веществ, которые могут дать сходный аналитический сигнал. Для судебно-химического исследования такими интерферентами могут быть эндогенные вещества биологических образцов, лекарственные препараты, метаболиты, загрязнители, продукты разложения и компоненты пробоподготовочных реагентов.
Специфичность подтверждают исследованием холостой матрицы, образцов с добавлением потенциальных интерферентов и контрольных образцов, содержащих целевое вещество. В хроматографических методах оценивают разделение пиков, время удерживания и отсутствие мешающих сигналов; при масс-спектрометрии дополнительно учитывают характерные ионные переходы и их соотношение. В иммунологических методах важным показателем является отсутствие или приемлемо низкая перекрёстная реактивность антител с химически близкими соединениями.
Специфичность следует отличать от других характеристик валидации. Прецизионность отражает согласованность результатов повторных измерений, правильность — близость результата к истинному или принятому опорному значению, а робастность — устойчивость методики к небольшим изменениям условий анализа. Поэтому именно способность распознавать целевой компонент среди других веществ соответствует понятию специфичности.
| Характеристика методики | Содержание | Пример оценки в судебно-химическом исследовании |
|---|---|---|
| Специфичность | Способность определять целевой аналит без влияния посторонних компонентов | Отсутствие мешающего сигнала в биологической матрице на участке обнаружения вещества |
| Селективность | Преимущественное распознавание аналита среди структурно сходных соединений | Различение токсиканта и его метаболита по времени удерживания и масс-спектру |
| Правильность | Близость среднего результата к истинному или аттестованному значению | Сопоставление найденной концентрации с концентрацией сертифицированного контрольного образца |
| Прецизионность | Степень согласованности результатов повторных измерений | Оценка относительного стандартного отклонения при анализе одной и той же пробы |
| Робастность | Сохранение рабочих характеристик при небольших изменениях условий анализа | Проверка влияния небольшого изменения pH, температуры, состава подвижной фазы или времени экстракции |
| Предел обнаружения | Наименьшее количество аналита, которое может быть выявлено, хотя его точное количественное определение ещё ограничено | Обнаружение следовых концентраций наркотического вещества в крови или моче |
| Предел количественного определения | Наименьшая концентрация, определяемая с установленными показателями правильности и прецизионности | Надёжное количественное установление содержания токсиканта в исследуемом объекте |
Высокая специфичность особенно важна при интерпретации результатов в судебной медицине, поскольку ошибочная идентификация постороннего соединения может привести к неверному выводу о наличии яда, наркотика или лекарственного препарата. Одного совпадения времени удерживания обычно недостаточно: результат подтверждают совокупностью независимых признаков и анализом контрольных образцов. При выявлении интерферирующих веществ методику модифицируют, например изменяют условия разделения, применяют дополнительную очистку или используют другой детектирующий принцип.