2) гомологичная рекомбинация
3) полногеномный скрининг
4) геномная гибридизация
Молекулярно-генетическая индивидуализация — это комплекс методов идентификации человека по индивидуальному сочетанию наследуемых признаков ДНК, выделенной из биологических следов. В судебно-экспертной практике чаще всего исследуют полиморфные STR-маркеры (short tandem repeats) аутосом, реже — маркеры Y-хромосомы, митохондриальной ДНК или SNP. После амплификации участков методом полимеразной цепной реакции и разделения продуктов капиллярным электрофорезом формируется генетический профиль, который сопоставляют с образцами проверяемых лиц.
Идентифицирующее значение имеет не отдельный участок ДНК, а совокупность аллелей по множеству независимых локусов. Совпадение профилей оценивают статистически: рассчитывают вероятность случайного совпадения либо отношение правдоподобия, учитывая частоты аллелей в соответствующей популяции. Метод позволяет устанавливать принадлежность биологического следа конкретному лицу, исключать его происхождение от исследуемого человека и решать вопросы родства; абсолютная индивидуальность профиля не распространяется, например, на монозиготных близнецов.
| Критерий | Характеристика молекулярно-генетической индивидуализации | Судебно-экспертное значение |
|---|---|---|
| Исследуемый материал | Кровь, буккальный эпителий, сперма, волосы с луковицей, ткани, костная ткань и другие объекты, содержащие ядерную или митохондриальную ДНК | Позволяет исследовать как сравнительные образцы, так и смешанные либо малые по объёму следы |
| Основные маркеры | Аутосомные STR; при необходимости — Y-STR, митохондриальные маркеры и SNP | Выбор системы зависит от пола, степени деградации ДНК, предполагаемого родства и характера следа |
| Лабораторная технология | Выделение ДНК, оценка её количества и качества, ПЦР-амплификация, разделение и компьютерная интерпретация фрагментов | Стандартизированный этапный анализ снижает риск ложных результатов и позволяет выявлять ингибирование или деградацию материала |
| Результат | Аллельный профиль по исследованным генетическим локусам | Профиль сравнивают с образцом конкретного лица либо с базой данных, соблюдая требования к качеству и происхождению образцов |
| Оценка совпадения | Вероятностно-статистический расчёт: вероятность случайного совпадения, отношение правдоподобия и частоты аллелей | Совпадение не формулируют как абсолютную достоверность; вывод зависит от полноты профиля и репрезентативности популяционных данных |
| Смешанные и родственные образцы | Возможны профили нескольких лиц, а также частичное совпадение при биологическом родстве | Требуются специальные алгоритмы деконволюции смесей и расчёт вероятности гипотез о родстве |
| Отличие от других генетических процессов | Направлена на прикладное установление происхождения биологического следа, а не на изучение рекомбинации, гибридизации или массового поиска геномных изменений | Именно идентификационная цель и анализ полиморфных маркеров определяют правильность выбранного термина |
Надёжность вывода определяется не только совпадением генетических профилей, но и соблюдением правил изъятия, упаковки, транспортировки и документирования цепочки хранения вещественных доказательств. При работе с деградированной ДНК или малым количеством материала применяют расширенные панели маркеров и подтверждающие методы. Интерпретация результата должна учитывать возможность контаминации, выпадения аллелей и артефактов амплификации. Поэтому молекулярно-генетическое заключение формулируют с указанием исследованных локусов, качества профиля и статистической силы полученных данных.