2) тонкослойной
3) ионообменной (+)
4) газожидкостной
В судебно-токсикологическом аналитическом скрининге применяют методы, позволяющие одновременно исследовать широкий спектр лекарственных средств, наркотических веществ, ядов и их метаболитов в биологических объектах. К таким подходам относятся тонкослойная, высокоэффективная жидкостная и газожидкостная хроматография. Они обеспечивают разделение компонентов сложной биологической матрицы с последующей визуальной, спектрофотометрической или масс-спектрометрической идентификацией.
Ионообменная хроматография основана на обратимом взаимодействии ионов анализируемого вещества с фиксированными заряженными группами сорбента. Разделение существенно зависит от pH, ионной силы и состава элюента, а эффективность метода наиболее высока при анализе неорганических ионов, аминокислот, белков и других заряженных соединений. Для широкого токсикологического поиска этот метод имеет ограниченную универсальность: многие ксенобиотики являются нейтральными или липофильными, а отдельные вещества требуют специальной пробоподготовки и условий элюирования.
Поэтому ионообменная хроматография может использоваться в отдельных специализированных аналитических задачах, но не относится к стандартным методам массового хроматографического скрининга в судебной токсикологии. После первичного обнаружения вещества его наличие и концентрацию подтверждают валидированными методами, чаще всего сочетанием жидкостной или газовой хроматографии с масс-спектрометрией.
| Метод | Основной механизм разделения | Типичные объекты или аналиты | Роль в токсикологическом исследовании |
|---|---|---|---|
| Тонкослойная хроматография | Адсорбция и распределение веществ между неподвижной и подвижной фазами | Лекарственные средства, алкалоиды, некоторые наркотические вещества | Быстрый ориентировочный скрининг большого числа экстрактов |
| Высокоэффективная жидкостная хроматография | Разделение в колонке под высоким давлением; возможны распределительный, адсорбционный и другие варианты взаимодействия | Полярные, термолабильные и нелетучие ксенобиотики, метаболиты | Скрининг и количественное определение; часто сочетается с УФ-, диодно-матричным или масс-спектрометрическим детектором |
| Газожидкостная хроматография | Распределение летучих веществ между газовой подвижной фазой и жидкой неподвижной фазой | Летучие растворители, спирты, углеводороды, термостабильные производные лекарственных веществ | Высокоэффективное разделение и последующая идентификация по времени удерживания и масс-спектру |
| Ионообменная хроматография | Электростатическое взаимодействие заряженных аналитов с ионогенными группами сорбента | Ионы, аминокислоты, пептиды, белки и отдельные заряженные соединения | Специализированный анализ, но не универсальный рутинный токсикологический скрининг |
| Первичный скрининг | Поиск максимально широкого набора потенциально опасных веществ | Кровь, моча, содержимое желудка, ткани и экстракты биоматериала | Предварительное выявление вещества с последующей необходимостью подтверждения |
| Подтверждающий анализ | Комбинация разделения и высокоспецифичной регистрации сигнала | Предположительно обнаруженные яды, наркотики и лекарственные средства | Идентификация по спектру, времени удерживания и, при необходимости, количественная оценка |
Выбор метода определяется летучестью, полярностью, термостабильностью и степенью ионизации вещества. Универсальность скрининга достигается сочетанием различных видов экстракции и хроматографических платформ, а не использованием одного сорбционного механизма. Отрицательный результат ионообменного анализа не исключает наличие нейтральных или липофильных токсикантов. Окончательное экспертное заключение основывают на результатах подтверждающего исследования и оценке их аналитической специфичности.