2) относительным временем
3) объемом
4) абсолютным временем (+)
Абсолютное время удерживания — это промежуток от момента введения пробы в хроматографическую систему до регистрации максимума пика определяемого вещества детектором. Оно отражает суммарное время прохождения вещества через колонку: часть пути соединение проводит в подвижной фазе, а часть — взаимодействуя с неподвижной фазой. Чем сильнее сорбция или иное межфазное взаимодействие с неподвижной фазой, тем позднее происходит элюирование и тем больше значение времени удерживания.
Термин абсолютное подчёркивает, что показатель выражается непосредственно во времени и определяется в конкретных условиях анализа: при заданных составе элюента, температуре, скорости потока, типе и длине колонки. Исправленное время удерживания рассчитывают как разность между временем удерживания вещества и мёртвым временем системы, относительное — сопоставляют со временем удерживания стандарта, а объём удерживания получают умножением времени на объёмную скорость потока. Поэтому для описания времени, необходимого для элюирования вещества, используется именно абсолютное время удерживания.
В судебно-химическом исследовании этот параметр применяют для предварительной идентификации соединения путём сравнения с эталонным веществом, исследованным при тех же условиях. Само совпадение времени удерживания не является достаточным доказательством тождества, поскольку разные вещества могут элюироваться близко или одновременно. Окончательная интерпретация требует совокупной оценки хроматографического профиля, характеристик пика и, при необходимости, данных масс-спектрометрии или другого селективного детектирования.
| Показатель | Обозначение и расчёт | Содержание | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Абсолютное время удерживания | tR | Время от введения пробы до максимума пика вещества | Основной показатель момента элюирования при заданных условиях анализа |
| Мёртвое время | tM или t0 | Время прохождения через колонку незадерживаемого компонента | Характеризует прохождение подвижной фазы и используется для коррекции |
| Исправленное время удерживания | t′R = tR − tM | Часть времени, обусловленная взаимодействием вещества с неподвижной фазой | Позволяет исключить вклад времени прохождения подвижной фазы |
| Относительное время удерживания | tR(x) / tR(эталона) | Отношение времени удерживания анализируемого соединения к показателю стандарта | Удобно для сопоставления результатов между сериями при одинаковой методике |
| Объём удерживания | VR = F · tR | Объём подвижной фазы, прошедший через колонку к моменту выхода пика; F — скорость потока | Применяется при объёмной, а не временной характеристике элюирования |
| Коэффициент удерживания | k′ = (tR − tM) / tM | Безразмерная оценка степени задерживания вещества колонкой | Позволяет сравнивать удерживание при изменении условий и состава фаз |
Значение времени удерживания действительно только при стандартизованных параметрах хроматографического анализа. На него влияют температура, состав и скорость подвижной фазы, свойства неподвижной фазы и состояние колонки. В документации результат обычно фиксируют вместе с условиями метода и допуском идентификации относительно эталонного пика. Для судебно-химического вывода временной показатель рассматривают как один из признаков, а не как единственный критерий установления состава вещества.