2) сыворотки исследуемой крови со стандартными эритроцитами группы А (II) и В (III)
3) эритроцитов крови с изотоническим раствором хлористого натрия, т.е. исключить аутоагглютинацию (+)
4) эритроцитов исследуемой крови с сывороткой группы АВ (IV)
При определении группы крови по системе ABO цоликлоны анти-А и анти-В выявляют соответствующие антигены на мембране эритроцитов. Для группы AB (IV) ожидается агглютинация с обоими реагентами. Однако одинаковая реакция с двумя цоликлонами может быть обусловлена не только наличием антигенов A и B, но и спонтанным склеиванием эритроцитов, то есть аутоагглютинацией.
Для исключения этого артефакта эритроциты исследуемой крови смешивают с изотоническим раствором натрия хлорида без диагностического реагента. Отрицательная реакция в таком контроле подтверждает, что агглютинация с анти-А и анти-В является специфической антиген-антительной реакцией. Если же агглютинация возникает и в физиологическом растворе, результаты прямого определения группы нельзя интерпретировать без дополнительного обследования: возможны холодовые аутоантитела, неспецифическая агрегация или другие причины спонтанного склеивания эритроцитов.
Исследование сыворотки со стандартными эритроцитами A (II) и B (III) является обратным определением группы и используется для подтверждения результата: при группе AB в сыворотке обычно отсутствуют анти-А и анти-В. Тем не менее именно контроль с физиологическим раствором позволяет установить, не обусловлена ли выявленная агглютинация свойствами самих эритроцитов, поэтому отмеченный вариант является необходимым первым контрольным исследованием.
| Ситуация | Реакция с анти-А | Реакция с анти-В | Контроль с физиологическим раствором | Интерпретация |
|---|---|---|---|---|
| Истинная группа AB (IV) | Агглютинация | Агглютинация | Отрицательный | На эритроцитах присутствуют антигены A и B; результат прямого типирования достоверен |
| Группа A (II) | Агглютинация | Отсутствует | Отрицательный | Выявлен антиген A |
| Группа B (III) | Отсутствует | Агглютинация | Отрицательный | Выявлен антиген B |
| Группа O (I) | Отсутствует | Отсутствует | Отрицательный | Антигены A и B не выявляются |
| Аутоагглютинация | Может быть положительной | Может быть положительной | Положительный | Прямое типирование недостоверно; необходимо исключить холодовые аутоантитела и неспецифическую агрегацию |
| Расхождение прямого и обратного типирования | Не соответствует ожидаемой картине | Не соответствует ожидаемой картине | Отрицательный или сомнительный | Требуются повторное исследование, проверка реагентов и расширенное серологическое обследование |
При положительном контроле с физиологическим раствором образец следует исследовать повторно с соблюдением температурного режима и после оценки наличия аутоантител. Для уточнения причины могут применяться прямая антиглобулиновая проба, исследование сыворотки и обратное типирование. Окончательное заключение о группе AB (IV) допустимо только при согласовании результатов прямого и обратного определения. До разрешения серологического расхождения переливание компонентов ABO-совместимой крови проводят с повышенными мерами предосторожности.