2) 35-37 (+)
3) 50-55
4) 42-45
Вирусы гриппа относятся к оболочечным РНК-содержащим вирусам семейства Orthomyxoviridae и размножаются только в живых клетках. Оптимальной для их репродукции и сохранения жизнеспособности клеточных культур является температура 35–37 °C, близкая к температуре организма человека. В лабораторной практике вирус культивируют в развивающихся куриных эмбрионах, клеточных культурах MDCK, первичных культурах эпителия и других восприимчивых клеточных системах.
При указанной температуре обеспечивается активность вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы, синтез вирусных белков и сборка новых вирионов, а клетки-хозяева сохраняют нормальный метаболизм. Размножение вируса выявляют по цитопатическому эффекту, гемадсорбции эритроцитов или гемагглютинации в культуральной жидкости; при этом отсутствие выраженного цитопатического эффекта не исключает репликацию вируса. Поэтому температура 35–37 °C является стандартным условием вирусологического культивирования и соответствует отмеченному варианту ответа.
Более низкие температуры могут замедлять репликацию и использоваться в отдельных экспериментальных моделях, например для изучения преимущественного размножения вируса в верхних дыхательных путях. Температуры 42–45 °C и выше неблагоприятны для клеточных культур и нарушают стабильность вирусных белков, а нагревание до 50–55 °C обычно приводит к быстрой утрате инфекционности. Следовательно, выбор температурного режима основан не на диагностическом критерии, а на необходимости создать условия для эффективного размножения вируса вне организма.
| Объект или режим | Температура | Практическое значение |
|---|---|---|
| Клеточная культура MDCK | 35–37 °C | Стандартное культивирование вирусов гриппа; оценка репликации и получение вирусного материала |
| Развивающийся куриный эмбрион | Около 35–37 °C | Размножение вируса в аллантоисной или амниотической полости с последующим выявлением гемагглютинина |
| Первичная культура эпителия дыхательных путей | 35–37 °C | Модель, наиболее близкая к естественным клеткам-мишеням вируса |
| Температура верхних дыхательных путей | Около 32–35 °C | Физиологическое условие, способствующее репликации некоторых штаммов в носоглотке; не является стандартным ответом для лабораторного культивирования |
| 22–25 °C | Комнатная температура | Репликация резко замедляется или становится недостаточной для стандартного выделения вируса |
| 42–45 °C | Повышенная температура | Нарушение жизнеспособности клеток и снижение эффективности репликации вируса |
| 50–55 °C | Выраженный нагрев | Быстрая потеря инфекционности вследствие повреждения оболочки и вирусных белков |
После культивирования вирус гриппа подтверждают серологическими или молекулярными методами, прежде всего реакцией гемагглютинации, реакцией торможения гемагглютинации и ОТ-ПЦР. Для эпидемиологического надзора дополнительно определяют тип вируса и его антигенный подтип. Культивирование требует соблюдения условий биологической безопасности, поскольку полученный материал содержит инфекционный вирус. Температура 35–37 °C обеспечивает оптимальный баланс между активностью вирусной репликации и жизнеспособностью клеток-хозяев.