2) анти-Ig G антитела, конъюгированные ферментами
3) анти-Ig G антитела, меченные радиоактивным йодом
4) анти-Ig E антитела, конъюгированные ферментами (+)
Для определения концентрации иммуноглобулина E методом ИФА используют антитела к человеческому IgE, конъюгированные с ферментом. В наиболее распространённом сэндвич -формате IgE пациента связывается с иммобилизованными антителами к IgE, после чего добавляется второе анти-IgE-антитело с ферментной меткой. После внесения субстрата фермент вызывает окрашенную реакцию; интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству IgE в образце и рассчитывается по калибровочной кривой.
Радиоактивно меченные антитела применяются в радиоиммунологических методах, но не относятся к ИФА. Антитела к IgG специфичны к другому классу иммуноглобулинов и позволяют исследовать IgG, а не IgE. В зависимости от конструкции тест-системы можно определять общий IgE или аллерген-специфический IgE: в последнем случае на твёрдой фазе фиксируют аллерген, а связавшийся специфический IgE выявляют фермент-меченым анти-IgE-антителом.
| Вариант метода или реагента | Определяемый показатель | Принцип регистрации |
|---|---|---|
| Анти-IgE-антитела, конъюгированные с ферментом | Общий или аллерген-специфический IgE | Ферментативное окрашивание; интенсивность сигнала пропорциональна концентрации IgE |
| Иммобилизованные анти-IgE-антитела в сэндвич -ИФА | Преимущественно общий сывороточный IgE | Захват IgE на твёрдой фазе и выявление вторым фермент-меченым анти-IgE-антителом |
| Аллерген на твёрдой фазе и фермент-меченое анти-IgE | Аллерген-специфический IgE | Количество связавшегося IgE отражает сенсибилизацию к конкретному аллергену |
| Анти-IgE-антитела, меченные радиоактивным йодом | IgE радиоиммунологическим методом | Регистрация радиоактивности; это не ИФА, поскольку отсутствует ферментный субстрат |
| Анти-IgG-антитела, конъюгированные с ферментами | Иммуноглобулин G | Ферментный сигнал характеризует содержание IgG, а не IgE |
| Анти-IgG-антитела, меченные радиоактивным йодом | IgG радиоиммунологическим методом | Радиометрическая регистрация специфического связывания анти-IgG |
Повышенный общий IgE поддерживает наличие атопической предрасположенности, паразитарной инвазии или отдельных иммунопатологических состояний, однако сам по себе не подтверждает конкретную аллергию. Нормальная концентрация общего IgE также не исключает локальную или IgE-опосредованную сенсибилизацию. Результаты оценивают с учётом возраста, референсных интервалов лаборатории, клинической картины и данных об аллерген-специфических антителах.