2) полимеразная цепная реакция (ПЦР)
3) иммуноферментный анализ (ИФА) (+)
4) реакция связывания комплемента (РСК)
Иммуноферментный анализ (ИФА) применяется для выявления общего и, главным образом, аллерген-специфического иммуноглобулина E (sIgE) в сыворотке крови. При IgE-опосредованной аллергии аллерген-специфические IgE связываются с высокоаффинными FcεRI-рецепторами тучных клеток и базофилов; повторный контакт с аллергеном вызывает их активацию и выброс медиаторов, что лежит в основе немедленных аллергических реакций. Определение sIgE позволяет лабораторно подтвердить сенсибилизацию к конкретному аллергену или группе аллергенов.
Принцип ИФА заключается в специфическом взаимодействии антигена аллергена с антителами исследуемой сыворотки и последующем выявлении связавшегося IgE ферментной меткой. После добавления субстрата развивается окрашенная реакция, интенсивность которой пропорциональна концентрации определяемого показателя и оценивается фотометрически. Результат обычно представляют количественно или в виде классов сенсибилизации; его необходимо интерпретировать вместе с анамнезом и клиническими проявлениями, поскольку наличие sIgE свидетельствует о сенсибилизации, но не всегда доказывает клинически значимую аллергию.
ИФА особенно полезен, когда кожное тестирование невозможно или нежелательно: при распространённых кожных заболеваниях, высоком риске системной реакции, приёме лекарственных средств, влияющих на результаты кожных проб, а также у пациентов, не способных сотрудничать при обследовании. Ограничениями метода являются возможная перекрёстная реактивность аллергенов, зависимость результата от качества аллергенных экстрактов и отсутствие прямой оценки тяжести будущей реакции.
| Метод или показатель | Что определяется | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| ИФА на аллерген-специфический IgE | sIgE к отдельному аллергену или панели аллергенов | Подтверждает сенсибилизацию; результат сопоставляют с симптомами и временем их возникновения |
| ИФА на общий IgE | Суммарная концентрация IgE в сыворотке | Может повышаться при атопии, паразитозах и некоторых других состояниях; не указывает на конкретный аллерген |
| Кожные прик-тесты | Локальную реакцию на введение стандартизированного аллергена | Метод in vivo для оценки немедленной гиперчувствительности; требует соблюдения противопоказаний и отмены ряда препаратов |
| РНГА | Агглютинацию эритроцитов, нагруженных антигеном или антителом | Не является основным методом выявления IgE-зависимой сенсибилизации |
| ПЦР | Нуклеиновые кислоты микроорганизмов или генетические последовательности | Используется для диагностики инфекций и генетических состояний, а не для непосредственного определения аллерген-специфического IgE |
| РСК | Потребление компонентов комплемента иммунными комплексами | Исторически применялась для серологической диагностики отдельных инфекций; не отражает специфический IgE-ответ |
ИФА относится к методам in vitro и не провоцирует у пациента аллергическую реакцию. Наиболее информативным для подтверждения конкретной аллергии является определение sIgE к клинически значимому аллергену, а не изолированная оценка общего IgE. Отрицательный результат не исключает заболевание при недостаточной чувствительности теста или неправильном выборе аллергена. Окончательное заключение формируют с учётом анамнеза, фенотипа симптомов, данных физикального обследования и, при необходимости, результатов кожных проб или компонентной аллергодиагностики.