2) 1:10
3) 1:20
4) 2:10
Правильное соотношение — 1:1. При таком внесении равные объёмы исследуемого материала и питательной среды двойной концентрации смешиваются, в результате чего компоненты среды переходят к рабочей, стандартной концентрации. Это обеспечивает оптимальные условия для восстановления и размножения сальмонелл, присутствующих в небольшом количестве или находящихся в повреждённом физиологическом состоянии.
Использование среды двойной концентрации компенсирует её разбавление испражнениями, содержащими фосфатно-буферный раствор. Более высокое соотношение материала привело бы к избыточному разведению питательных и селективных компонентов, а меньший объём материала мог бы снизить вероятность обнаружения возбудителя. После этапа обогащения выполняют пересев на селективно-дифференциальные плотные среды с последующей идентификацией подозрительных колоний биохимическими, серологическими и, при необходимости, молекулярно-генетическими методами.
| Этап исследования | Материал или среда | Основная задача | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Отбор материала | Испражнения, рвотные массы, промывные воды или пищевые продукты | Получение репрезентативной пробы до начала антибактериальной терапии | Повышает вероятность выделения возбудителя |
| Транспортирование | Фосфатно-буферный раствор или другой разрешённый транспортный раствор | Сохранение жизнеспособности микроорганизмов и предотвращение высыхания пробы | Снижает риск ложноотрицательного результата при задержке доставки |
| Первичное обогащение | Среда обогащения двойной концентрации и исследуемый материал в равных объёмах | Восстановление и накопление сальмонелл при одновременном подавлении части сопутствующей микрофлоры | Именно поэтому применяется соотношение 1:1 |
| Пересев на плотные среды | Селективно-дифференциальные среды, например висмут-сульфитный агар, среды Эндо, Плоскирева или их современные аналоги | Получение изолированных колоний и первичный отбор подозрительных вариантов | Оценивают цвет, форму, размер, прозрачность, почернение и другие типичные признаки колоний |
| Видовая идентификация | Биохимические тесты и идентификационные системы | Подтверждение принадлежности изолята к роду Salmonella и определение биохимического профиля | Учитывают ферментацию углеводов, образование сероводорода, уреазную и индольную реакции |
| Серологическое подтверждение | Агглютинация с диагностическими О- и Н-сыворотками | Определение антигенной структуры выделенного штамма | Позволяет провести серотипирование и эпидемиологическую характеристику изолята |
Соотношение 1:1 является методическим условием первичного посева материала в среду двойной концентрации, а не показателем степени разведения образца. Результат посева оценивают только в совокупности с данными последующего выделения чистой культуры и её идентификации. Отрицательный результат не исключает сальмонеллёз при позднем исследовании, предварительной антибиотикотерапии или низкой концентрации возбудителя в пробе.