2) сыворотки диагностические сальмонеллёзные неадсорбированные к каждой из отдельных серогрупп (A, B, C1, C2, D, E)
3) акролеинизированные куриные эритроциты, сенсибилизированные сальмонеллами
4) 1% взвесь формалинизированных эритроцитов барана, сенсибилизированных антигенами из сальмонелл (+)
Комплексный эритроцитарный сальмонеллёзный диагностикум представляет собой 1% взвесь формалинизированных эритроцитов барана, на поверхности которых адсорбированы очищенные О-антигены сальмонелл. Формалинизация стабилизирует эритроциты, уменьшает их спонтанный гемолиз и позволяет использовать клетки как инертный носитель антигенов. Набор О-антигенов нескольких серогрупп обеспечивает выявление антител к наиболее эпидемиологически значимым вариантам Salmonella.
РПГА основана на пассивной гемагглютинации: при наличии в сыворотке специфических антител они связываются с О-антигенами, фиксированными на разных эритроцитах, и формируют видимую сетчатую агглютинацию. Положительная реакция проявляется равномерным оседанием клеток в виде зонтика или диффузного слоя на дне лунки; при отрицательном результате эритроциты собираются в компактную пуговку . Исследование проводят в последовательных разведениях сыворотки, а результат оценивают по максимальному разведению, в котором сохраняется специфическая агглютинация.
Диагностикум принципиально отличается от диагностических сывороток: он содержит не готовые антитела, а корпускулярный носитель с адсорбированными антигенами. Поэтому неадсорбированные сальмонеллёзные сыворотки применяют преимущественно для серологической идентификации культур сальмонелл, тогда как эритроцитарный диагностикум предназначен для обнаружения антител в сыворотке обследуемого пациента.
| Компонент или метод | Состав | Основное назначение | Диагностический признак |
|---|---|---|---|
| Комплексный эритроцитарный диагностикум | Формалинизированные эритроциты барана с адсорбированными О-антигенами | Выявление антител к нескольким О-антигенам Salmonella | Диффузная гемагглютинация при положительной РПГА |
| Моновалентный эритроцитарный диагностикум | Эритроциты, сенсибилизированные отдельным антигеном | Уточнение антигенной специфичности выявленных антител | Реакция только с соответствующим антигенным вариантом |
| Неадсорбированная диагностическая сыворотка | Антитела к нескольким антигенам или серогруппам сальмонелл | Ориентировочная идентификация выделенной бактериальной культуры | Агглютинация исследуемых микроорганизмов |
| Адсорбированная диагностическая сыворотка | Специфические антитела после удаления перекрёстно реагирующих фракций | Точная серологическая идентификация изолята | Узкоспецифическая агглютинация культуры |
| Положительная РПГА | Комплексы антиген на эритроците — антитело | Подтверждение наличия специфических антител | Равномерный слой или зонтик эритроцитов |
| Отрицательная РПГА | Отсутствие специфического связывания | Исключение диагностически значимого титра антител | Компактный осадок в виде пуговки |
Серологический результат необходимо интерпретировать с учётом сроков заболевания, поскольку антитела могут отсутствовать в ранний период инфекции. Более убедительным признаком служит нарастание титра антител не менее чем в четыре раза при исследовании парных сывороток. Возможны перекрёстные реакции с антигенно родственными энтеробактериями, поэтому РПГА не заменяет бактериологическое выделение и идентификацию возбудителя. Окончательное заключение формируют на основании совокупности клинических, эпидемиологических и лабораторных данных.