↑ Вверх ↓ Вниз

Культивирование облигатно анаэробных бактерий в обычной атмосфере проводится на среде (ответ на вопрос)

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ОБЛИГАТНО АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ В ОБЫЧНОЙ АТМОСФЕРЕ ПРОВОДИТСЯ НА СРЕДЕ
1) Мюллера-Хинтона
2) Мана-Рогозы-Шарпа
3) Китта-Тароцци (+)
4) Клауберга

Среда Китта—Тароцци предназначена для накопления и первичного культивирования облигатно анаэробных бактерий. Она представляет собой восстановленную жидкую питательную среду на основе мясо-пептонного бульона с глюкозой и кусочками печени; поверхность обычно покрывают слоем стерильного вазелинового масла. Такая конструкция снижает окислительно-восстановительный потенциал среды и препятствует диффузии кислорода, поэтому анаэробы могут размножаться даже при отсутствии специальной анаэростатной системы.

Механизм основан на удалении растворённого кислорода и создании анаэробной микрозоны в толще среды. Кусочки печени и восстановительные компоненты связывают кислород, а масло изолирует бульон от атмосферного воздуха. Это особенно важно для клостридий, бактероидов, фузобактерий и других строгих анаэробов, у которых недостаточно ферментов защиты от активных форм кислорода, поэтому молекулярный кислород подавляет рост или вызывает гибель клеток.

При работе со средой материал вносят преимущественно в глубину бульона, после чего пробирку герметизируют. Однако современная лабораторная диагностика обычно дополнительно предусматривает бескислородную транспортировку материала, использование восстановленных плотных сред и инкубацию в анаэростате или анаэробной камере. Среда Китта—Тароцци служит прежде всего для обогащения культуры; окончательная идентификация возбудителя требует пересевов и применения биохимических, масс-спектрометрических или молекулярных методов.

Среда или методОсновное назначениеРоль кислородаДиагностическое значение
Китта—ТароцциНакопление и культивирование облигатных анаэробовВосстановленная среда и масляный слой снижают доступ кислородаРост в глубине бульона указывает на жизнеспособность анаэробной микрофлоры; необходим последующий пересев
Тиогликолевая средаОценка отношения микроорганизма к кислороду и выращивание анаэробовФормирует градиент кислорода: его концентрация максимальна у поверхностиСтрогие анаэробы растут в нижних слоях, аэробы — у поверхности, факультативные анаэробы — по всей толще
Кровяной агар для анаэробовВыделение изолированных колоний и изучение гемолизаТребует инкубации в анаэробной атмосфереПозволяет оценивать морфологию колоний, гемолиз, пигмент и другие культуральные признаки
Мюллера—ХинтонаСтандартизованное определение чувствительности к антибиотикамНе создаёт сама по себе полноценного анаэробного режимаДля анаэробов применяется только в адаптированном протоколе и при контролируемой анаэробной инкубации
Мана—Рогозы—ШарпаКультивирование лактобацилл и других молочнокислых бактерийСниженная кислотность и состав среды селективны для молочнокислой микрофлоры, но не заменяют анаэробную системуИспользуется преимущественно для Lactobacillus и родственных микроорганизмов
Среда КлаубергаВыделение и дифференциация коринебактерий, прежде всего Corynebacterium diphtheriaeРассчитана на обычное культивирование аэробных или факультативных микроорганизмовТеллурит и кровяные компоненты помогают выявлять характерные колонии возбудителя дифтерии

Положительный рост в среде Китта—Тароцци не является достаточным основанием для видовой идентификации, поскольку среда поддерживает развитие разных анаэробных микроорганизмов. Для подтверждения проводят микроскопию, пересев на селективные и дифференциальные плотные среды, а также MALDI-TOF-масс-спектрометрию или ПЦР. Надёжность результата во многом зависит от правильного забора и транспортировки материала без контакта с кислородом. Поэтому среда Китта—Тароцци сочетает питательную функцию с созданием восстановительной, благоприятной для анаэробов среды.

Поделитесь с коллегами ссылкой на наш сайт