2) утратили клеточную стенку и не сохранили способность к размножению
3) имеют наружную мембрану
4) утратили клеточную стенку, но сохранили способность к размножению (+)
L-формы бактерий — это жизнеспособные клеточно-стеночно-дефицитные варианты, у которых отсутствует или резко нарушен пептидогликановый слой, но сохраняются цитоплазматическая мембрана, метаболическая активность и способность к репродукции. Они могут формироваться под воздействием антибиотиков, нарушающих синтез клеточной стенки, лизоцима, мутаций или других стрессовых факторов. Сохранение размножения в условиях осмотической защиты является принципиальным отличием L-форм от нежизнеспособных клеточных оболочек и фрагментов бактерий.
Из-за отсутствия ригидной стенки L-формы приобретают выраженный полиморфизм, отличаются осмотической нестабильностью и могут плохо окрашиваться по Граму или вообще не выявляться этим методом. Культивирование обычно требует осмотически защищённых сред; в плотных средах возможны характерные колонии типа fried egg — с плотным центром, внедрённым в агар, и расплывчатым периферическим ободком. У некоторых вариантов после устранения индуцирующего фактора возможна реверсия к исходной бактериальной форме.
Наличие наружной мембраны не является обязательным признаком L-формы: она характерна прежде всего для грамотрицательных бактерий и может изменяться при перестройке клеточной оболочки. Диагностически значимы сочетание морфологической вариабельности, роста на осмотически стабилизированных средах, подтверждение жизнеспособности и, при необходимости, восстановление исходного фенотипа. Поэтому правильным является утверждение о потере клеточной стенки при сохранении способности к размножению.
| Признак | L-формы | Практическое значение |
|---|---|---|
| Клеточная стенка | Отсутствует полностью или представлена фрагментарно; пептидогликановый каркас резко редуцирован | Определяет уязвимость к осмотическому лизису и изменение формы клетки |
| Цитоплазматическая мембрана | Сохраняется и обеспечивает обмен веществ, энергетические процессы и жизнеспособность | Объясняет возможность существования и размножения без клеточной стенки |
| Морфология | Выраженный полиморфизм: сферические, нитевидные, вакуолизированные и неправильные формы | Может затруднять микроскопическую идентификацию и оценку чистоты культуры |
| Размножение | Сохраняется; возможны деление, почкование и фрагментация мембранных структур | Отличает L-формы от разрушенных или погибших бактериальных клеток |
| Условия культивирования | Предпочтительны среды с повышенной осмолярностью, например с сахарозой или солями-стабилизаторами | Обычная среда без осмотической защиты может приводить к лизису и ложноотрицательному результату посева |
| Окраска по Граму | Нестабильная, слабая или отрицательная независимо от исходной грампринадлежности бактерии | Отрицательный результат окраски не исключает наличие жизнеспособных стеночно-дефицитных форм |
| Обратимость | Нестабильные L-формы способны вернуться к исходному бактериальному фенотипу; стабильные сохраняют дефект | Ревeрсия может иметь значение для персистенции инфекции и повторного появления типичных бактерий |
| Чувствительность к терапии | Препараты, мишенью которых является синтез клеточной стенки, действуют слабее на стеночно-дефицитные формы | Выбор лечения проводят с учётом исходного микроорганизма, возможности реверсии и результатов определения чувствительности |
Обнаружение L-форм требует сочетания культуральных, микроскопических и, при необходимости, молекулярно-генетических методов. Их следует отличать от протопластов и сферопластов, которые обычно получают экспериментально и рассматривают как формы с полной или частичной утратой стенки соответственно. Клиническое значение L-форм связано прежде всего с персистированием бактерий, трудностями диагностики и возможным возобновлением типичной инфекции после восстановления клеточной стенки.