2) бактериологический
3) биологический
4) РИФ с исследуемым материалом
При хроническом бруцеллёзе бактериемия обычно имеет низкую интенсивность и носит интермиттирующий характер, поэтому выделение возбудителя из крови или другого клинического материала удаётся непостоянно. Основное диагностическое значение приобретает выявление специфического иммунного ответа — антител к антигенам Brucella и сенсибилизации организма. Используют реакции агглютинации, антиглобулиновый тест Кумбса, ИФА с определением IgM и IgG, реакцию связывания комплемента и другие серологические методы.
В хронической фазе преобладают длительно сохраняющиеся IgG и неполные, или блокирующие, антитела, которые могут слабо проявляться в стандартной реакции агглютинации. Поэтому отрицательный или невысокий титр агглютинирующих антител не исключает заболевание: более информативны ИФА, реакция Кумбса, исследование парных сывороток и оценка серологических показателей в динамике. Интерпретация результатов проводится совместно с клиническими проявлениями, сведениями о контакте с сельскохозяйственными животными или непастеризованными продуктами и данными о ранее перенесённой инфекции.
Бактериологический метод имеет высокую специфичность, но при хроническом процессе отличается низкой чувствительностью, требует длительного культивирования и связан с высоким риском лабораторного заражения. Биологическая проба применяется ограниченно, а прямая реакция иммунофлуоресценции с материалом недостаточно чувствительна при малом количестве возбудителя и не является основным способом подтверждения хронического заболевания. Поэтому правильным является выбор иммунологического метода.
| Метод или показатель | Диагностическая роль при хроническом бруцеллёзе | Основные ограничения |
|---|---|---|
| ИФА | Выявляет специфические IgM и IgG; длительное обнаружение IgG поддерживает диагноз при соответствующей клинической картине | Возможны перекрёстные реакции и сохранение антител после перенесённой инфекции |
| Реакция агглютинации Райта, реакция Хеддельсона | Определяют агглютинирующие антитела; полезны для первичной серологической оценки и наблюдения в динамике | При хроническом течении титр может быть низким из-за преобладания неполных антител |
| Антиглобулиновый тест Кумбса | Выявляет неполные и блокирующие антитела, повышая чувствительность серологической диагностики хронических форм | Результат оценивают только в связи с клиническими и эпидемиологическими данными |
| Исследование парных сывороток | Нарастание титра антител или сероконверсия подтверждают активность инфекционного процесса | При длительном хроническом течении выраженной динамики антител может не быть |
| Бактериологический метод | Выделение Brucella является прямым и высокоспецифичным подтверждением инфекции | Низкая чувствительность при хронической форме, длительные сроки культивирования и высокий риск инфицирования персонала |
| Прямая РИФ с исследуемым материалом | Позволяет непосредственно обнаружить антиген возбудителя при достаточном его содержании в образце | При хроническом процессе количество бактерий часто недостаточно для надёжного выявления |
Серологический результат не следует трактовать изолированно, поскольку антитела могут сохраняться после выздоровления, а также обнаруживаться после вакцинации или при перекрёстных иммунных реакциях. Наиболее убедительно сочетание характерного анамнеза, клинических признаков хронического поражения и положительных иммунологических тестов в динамике. При подозрении на бруцеллёз работа с клиническим материалом и посевами должна выполняться с соблюдением усиленных требований биологической безопасности.