2) колиформными бактериями (+)
3) грибами рода кандида
4) бациллами
Энтеропатогенные иерсинии, прежде всего Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis, обладают психротрофными свойствами: сохраняют жизнеспособность и способны размножаться при температурах около 0–4 °C. При этом большинство сопутствующих колиформных бактерий имеет оптимум роста около 35–37 °C и при охлаждении размножается значительно медленнее. Поэтому в условиях низкой температуры иерсинии получают относительное конкурентное преимущество, а их доля в исследуемом материале возрастает.
Холодовое обогащение представляет собой выдерживание исследуемого материала в жидкой питательной среде при низкой температуре, обычно около 4 °C, в течение нескольких суток или более длительного срока. Метод особенно полезен при исследовании пищевых продуктов, воды и фекалий, содержащих большое количество кишечной микрофлоры. В результате подавления или замедления роста колиформных бактерий повышается вероятность последующего выделения иерсиний на селективных средах, например на агаре CIN.
Выделение культуры после холодового обогащения не является окончательным подтверждением диагноза. Подозрительные колонии идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам, MALDI-TOF-масс-спектрометрии или методами ПЦР; при необходимости проводят серотипирование и определение факторов вирулентности. Таким образом, именно контаминация материала колиформными бактериями наиболее обоснованно объясняет применение холодового обогащения как способа селективного накопления иерсиний.
| Критерий | Энтеропатогенные иерсинии | Колиформные бактерии |
|---|---|---|
| Таксономическая характеристика | Грамотрицательные коккобациллы или короткие палочки семейства Enterobacterales | Преимущественно грамотрицательные палочки семейства Enterobacterales |
| Отношение к температуре | Психротрофные; способны сохраняться и размножаться при 0–4 °C | Оптимально развиваются при 35–37 °C; при охлаждении рост большинства представителей резко замедляется |
| Значение холодового обогащения | Создаёт условия для селективного накопления иерсиний в материале с низкой исходной концентрацией возбудителя | Рост обычно подавляется или существенно замедляется, поэтому конкурентное преимущество уменьшается |
| Рост на селективной среде CIN | Обычно формируют небольшие колонии с характерным бычьим глазом : тёмным центром и прозрачной зоной | Большинство штаммов подавляется, но отдельные представители могут расти и требуют подтверждающей идентификации |
| Подвижность | Для многих штаммов характерна подвижность при 22–25 °C и отсутствие подвижности при 37 °C | Признак вариабелен и не используется изолированно для подтверждения иерсиниоза |
| Основные методы подтверждения | Биохимическая идентификация, MALDI-TOF, ПЦР, при необходимости серотипирование | Биохимические тесты, MALDI-TOF или ПЦР с учётом видовой принадлежности |
| Диагностическое значение | Холодовое обогащение повышает чувствительность выделения возбудителя из сложного, обильно контаминированного материала | Является фоновой или конкурентной микрофлорой, затрудняющей прямой высев и интерпретацию роста |
Психротрофность имеет особое значение при исследовании охлаждённых продуктов, поскольку иерсинии способны сохраняться в них и постепенно увеличивать численность. В клинической практике наиболее значимым видом является Y. enterocolitica, вызывающая энтероколит, терминальный илеит и синдром, напоминающий аппендицит. Холодовое обогащение следует рассматривать как этап накопления возбудителя, а не как самостоятельный видовой диагностический тест. Окончательное заключение основывается на совокупности культуральных, биохимических и молекулярно-генетических данных.