2) 48
3) 6
4) 72
Правильный ответ — 24 часа. Ядерные, или трековые, мембранные фильтры имеют тонкую поликарбонатную основу и сквозные поры строго заданного диаметра. Узкие изогнутые клетки Campylobacter, обладающие выраженной подвижностью благодаря полярным жгутикам, способны пройти через поры размером 0,46–0,55 мкм к поверхности питательного агара. Значительная часть более крупных и менее подвижных представителей сопутствующей кишечной микробиоты задерживается на мембране, поэтому их конкурирующий рост уменьшается без применения антибактериальных селективных компонентов.
После кратковременного контакта с посевным материалом фильтр удаляют, а чашку инкубируют в микроаэрофильной атмосфере. При оптимальной температуре, обычно 37–42 °C в зависимости от предполагаемого видового состава, прошедшие через мембрану жизнеспособные кампилобактерии формируют различимые колонии примерно через 24 часа. Таким образом, ускорение достигается не повышением скорости деления бактерий, а сокращением этапов обогащения и подавлением фоновой флоры физическим способом.
Отказ от селективных добавок также уменьшает риск угнетения чувствительных, повреждённых или редко встречающихся видов Campylobacter. Антибиотики, входящие в состав стандартных селективных сред, эффективно подавляют постороннюю микрофлору, но одновременно могут снижать выявляемость отдельных штаммов кампилобактерий и родственных микроорганизмов. Получение подозрительных колоний за 24 часа является этапом первичного выделения культуры; окончательная идентификация требует оценки морфологии, оксидазной активности и подтверждения видовой принадлежности биохимическими, масс-спектрометрическими или молекулярными методами.
| Диагностический параметр | Фильтрационный метод | Посев на селективную среду |
|---|---|---|
| Основной принцип селекции | Физическое разделение микроорганизмов по размеру, форме и подвижности | Химическое подавление сопутствующей флоры антибиотиками |
| Используемая мембрана | Ядерный поликарбонатный фильтр с калиброванными порами 0,46–0,55 мкм | Мембрана обычно не применяется |
| Поведение Campylobacter | Тонкие подвижные клетки проходят через поры и достигают поверхности агара | Рост зависит от устойчивости штамма к селективным компонентам |
| Сопутствующая микрофлора | Большинство более крупных или малоподвижных бактерий задерживается фильтром | Подавляется антимикробными добавками |
| Питательная основа | Неселективный обогащённый агар, часто с добавлением крови | Селективный агар, например модифицированный угольно-дезоксихолатный агар |
| Срок появления подозрительных колоний | Около 24 часов при оптимальной инкубации | Чаще требуется 24–48 часов, иногда с предварительным обогащением |
| Диагностическое преимущество | Быстрое выделение и более широкий охват чувствительных или нетипичных видов | Удобное подавление обильной фоновой флоры, но возможен селективный сдвиг |
Культивирование необходимо проводить при пониженном содержании кислорода, поскольку Campylobacter относятся к микроаэрофильным бактериям. Температура около 42 °C преимущественно используется для выделения термотолерантных C. jejuni и C. coli, тогда как инкубация при 37 °C расширяет возможности обнаружения других видов. Подозрительные колонии обычно сероватые, плоские или слегка выпуклые, а в мазке выявляются грамотрицательные изогнутые либо S-образные палочки. Результат посева считается подтверждённым только после идентификации выделенного изолята.