2) скротальный
3) кардиотоксический
4) нефротоксический
Дерматонекротическая проба отражает способность токсинов клостридий вызывать локальное повреждение кожи и подкожной клетчатки. При внутрикожном введении морской свинке фильтрата исследуемой культуры в месте инокуляции развиваются выраженный отёк, геморрагическое воспаление и некроз. Специфичность реакции подтверждают нейтрализацией токсина соответствующей антитоксической сывороткой: отсутствие поражения в защищённом участке свидетельствует о соответствии токсина определённому виду возбудителя.
Основное значение при клостридиальном мионекрозе имеет экзотоксинемия. В частности, α-токсин Clostridium perfringens, обладающий фосфолипазной, или лецитиназной, активностью, разрушает фосфолипиды клеточных мембран, вызывает гемолиз, сосудистое повреждение и быстрое омертвение тканей. Реакция с лецитовителлином выявляет эту ферментативную активность по образованию зоны помутнения или преципитации вокруг колоний и дополняет биологические пробы на летальность и дермонекроз.
| Диагностический признак | Метод исследования | Интерпретация |
|---|---|---|
| Летальное действие токсина | Биологическая проба на белых мышах | Гибель животных после введения культурального фильтрата указывает на наличие сильнодействующего экзотоксина |
| Дерматонекротическое действие | Внутрикожная проба на морских свинках | Появление отёка, геморрагического воспаления и некроза подтверждает тканеповреждающую активность токсина |
| Видовая специфичность токсина | Реакция нейтрализации с диагностическими антитоксическими сыворотками | Предотвращение токсического эффекта соответствующей сывороткой позволяет типировать возбудителя |
| Лецитиназная активность | Реакция на среде с лецитовителлином | Зона опалесценции или преципитации характерна прежде всего для α-токсина C. perfringens |
| Газообразование и ферментация | Посев в анаэробные питательные среды | Бурное расщепление углеводов с образованием кислоты и газа поддерживает идентификацию сахаролитических клостридий |
| Морфологические свойства | Микроскопия окрашенных препаратов | Крупные грамположительные спорообразующие палочки при соответствующей клинической картине указывают на клостридиальную этиологию |
| Современное подтверждение | ПЦР, выявление генов токсинов, MALDI-TOF масс-спектрометрия | Обеспечивает быструю видовую идентификацию и определение токсигенного профиля изолята |
Дерматонекротический тест относится к классическим методам определения токсигенности анаэробных клостридий и оценивает непосредственный биологический эффект их экзотоксинов. Его результат необходимо сопоставлять с культуральными, морфологическими и биохимическими свойствами выделенного штамма. В современной лабораторной практике биопробы преимущественно заменяются молекулярными и масс-спектрометрическими методами, однако принцип нейтрализации токсина сохраняет важное диагностическое значение. Выявление токсигенного возбудителя требует срочного информирования клинициста, поскольку клостридиальный мионекроз отличается стремительным прогрессированием и высокой летальностью.