2) Кода
3) глюкозо-пептонную
4) лактозо-пептонную (+)
Лактозо-пептонная среда является стандартной средой накопления при титрационном выявлении общих колиформных бактерий в питьевой воде. Пептон обеспечивает рост бактерий, а лактоза служит дифференцирующим углеводным субстратом. При наличии ОКБ происходит ферментация лактозы с образованием кислоты и газа, который фиксируется в газоуловителе или поплавке.
При титрационном методе в ряд пробирок с лактозо-пептонной средой вносят различные объемы исследуемой воды и инкубируют их при температуре, оптимальной для выявления ОКБ, обычно 37 ± 1 °C в течение 24 часов. Помутнение среды, изменение ее окраски при наличии индикатора, образование кислоты и газа расценивают как presumptive-положительный результат. Для окончательного подтверждения выполняют пересев на дифференциально-диагностические среды с последующей оценкой морфологических и биохимических свойств изолированных колоний.
Основным диагностическим признаком ОКБ служит способность грамотрицательных неспорообразующих палочек ферментировать лактозу с образованием кислоты и газа в заданных условиях. Результаты роста в пробирках с разными объемами воды используют для расчета коли-титра или наиболее вероятного числа бактерий. Глюкозо-пептонная среда не обеспечивает специфичной для данного исследования лактозной реакции, а среды Кесслера и Кода применяются в иных вариантах или направлениях микробиологического анализа и не заменяют лактозо-пептонную среду в указанной схеме.
| Этап или компонент | Диагностическое значение |
|---|---|
| Лактозо-пептонная среда | Среда накопления для первичного выявления ОКБ в засевах разных объемов воды. |
| Пептон | Источник азотистых соединений и других питательных компонентов, поддерживающих размножение бактерий. |
| Лактоза | Ферментируемый субстрат, позволяющий выявить характерную для колиформных бактерий реакцию. |
| Кислото- и газообразование | Первичный положительный признак ферментации лактозы; требует подтверждения пересевом и идентификацией. |
| Инкубация при 37 ± 1 °C | Создает условия для выявления общих колиформных бактерий, адаптированных к росту при температуре тела человека. |
| Титрационный учет | По сочетанию положительных и отрицательных проб при разных объемах воды рассчитывают коли-титр или наиболее вероятное число ОКБ. |
| Глюкозо-пептонная среда | Не дает специфического критерия ферментации лактозы и поэтому не используется как основная среда накопления ОКБ в данной методике. |
Лактозо-пептонная среда позволяет совместить накопление небольшого количества бактерий с первичной биохимической индикацией их принадлежности к колиформной группе. Отрицательный результат в пробирке не исключает загрязнение при исследовании малого объема, поэтому применяют ряд объемов воды. Положительная реакция рассматривается как ориентировочная и должна подтверждаться выделением чистой культуры. Количественная оценка санитарного состояния воды проводится с учетом нормативных показателей для ОКБ.