2) бластоз в костном мозге
3) титр химерного гена и химерного белка в периферической крови (+)
4) титр химерного гена в костном мозге
Основной маркер хронического миелоидного лейкоза (ХМЛ) — химерный ген BCR::ABL1, возникающий вследствие реципрокной транслокации t(9;22)(q34;q11.2) с формированием филадельфийской хромосомы. Он кодирует онкобелок BCR::ABL1, обладающий конститутивной тирозинкиназной активностью и поддерживающий пролиферацию миелоидных клеток. Ингибиторы тирозинкиназы подавляют этот молекулярный драйвер, поэтому динамика его уровня наиболее точно отражает глубину ответа на лечение.
Для контроля терапии первой линии количественно определяют транскрипт BCR::ABL1 в лейкоцитах периферической крови методом высокочувствительной обратной транскрипции с количественной ПЦР, результаты выражают по Международной шкале. В тестовой формулировке это обозначено как определение титра химерного гена и белка; строго говоря, в рутинной практике оценивают прежде всего РНК-транскрипт химерного гена, а не сам ген, тогда как определение белка p210 может иметь дополнительное значение и не заменяет стандартизированную ПЦР.
Периферическая кровь удобна для регулярного мониторинга и при наличии типичного транскрипта хорошо отражает опухолевую массу, включая минимальную остаточную болезнь. Морфологическая оценка бластов необходима главным образом для выявления прогрессии или бластного криза, а иммунофенотипирование не является основным методом контроля типичного ХМЛ. Исследование костного мозга применяют преимущественно при диагностике, подозрении на прогрессирование, атипичном транскрипте или несоответствии результатов.
| Показатель | Метод и материал | Клиническое значение |
|---|---|---|
| Уровень BCR::ABL1 | Количественная RT-qPCR, периферическая кровь | Стандартный способ динамического контроля молекулярного ответа на терапию |
| Молекулярный ответ через 3 месяца | Оценка отношения BCR::ABL1/контрольный ген | Благоприятный ориентир — уровень не выше 10% по Международной шкале |
| Молекулярный ответ через 6 месяцев | Количественная ПЦР периферической крови | Целевой уровень — не выше 1%; более высокий показатель требует оценки соблюдения терапии и тактики лечения |
| Молекулярный ответ через 12 месяцев | Количественная ПЦР периферической крови | Оптимальным считается достижение ≤0,1%, что соответствует большому молекулярному ответу (MMR) |
| Глубокий молекулярный ответ | Высокочувствительная RT-qPCR | MR4 соответствует ≤0,01%, MR4.5 — ≤0,0032% при соблюдении требований к качеству образца |
| Бластоз в костном мозге | Миелограмма и морфологическое исследование | Используется для диагностики ускоренной фазы и бластного криза, но не для рутинной количественной оценки раннего ответа |
| Минимальная остаточная болезнь методом иммунофенотипирования | Проточная цитометрия костного мозга или крови | Не является основным методом мониторинга ХМЛ при наличии типичного BCR::ABL1; информативность зависит от фенотипа клеток |
Снижение уровня BCR::ABL1 подтверждает эффективность ингибитора тирозинкиназы и позволяет своевременно выявить недостаточный ответ или потерю достигнутого ответа. При неожиданном повышении показателя необходимо проверить соблюдение режима лечения, лекарственные взаимодействия и выполнить анализ мутаций киназного домена BCR::ABL1 по показаниям. Оценка периферической крови предпочтительна для регулярного наблюдения, поскольку менее инвазивна и стандартизирована для количественной молекулярной диагностики.