2) неподвижными сперматозоидами (+)
3) сперматоцитами 1 порядка
4) сперматоцитами 2 порядка
После TESA/TESE в эякулят или аспират попадают сперматозоиды, еще не прошедшие полноценное созревание в придатке яичка. Поэтому они нередко имеют низкую или отсутствующую подвижность, однако могут сохранять жизнеспособность и функционально полноценный генетический материал. Для ИКСИ отбирают именно живые неподвижные сперматозоиды, предварительно подтверждая целостность клеточной мембраны и реакцию хвоста на механическое воздействие, гипоосмотический тест или лазерную стимуляцию.
Неподвижность сама по себе не означает гибель сперматозоида: после извлечения из ткани яичка отсутствие эпидидимального созревания и особенности обработки биоптата ограничивают формирование прогрессивной подвижности. Напротив, круглые сперматиды хотя и являются гаплоидными клетками, остаются незрелыми и не обладают сформированными механизмами оплодотворения; их использование методом ROSI рассматривается лишь как крайне ограниченный и недостаточно эффективный подход. Сперматоциты первого и второго порядка находятся на более ранних стадиях мейоза и не предназначены для стандартного проведения ИКСИ.
| Клеточная форма | Стадия созревания и плоидность | Пригодность для ИКСИ после TESA/TESE | Ключевой критерий отбора |
|---|---|---|---|
| Подвижный сперматозоид | Зрелая гаплоидная клетка, n | Стандартный материал для микроинъекции | Прогрессивная или локальная подвижность, сохранная морфология |
| Неподвижный, но жизнеспособный сперматозоид | Зрелая гаплоидная клетка, n | Предпочтительный вариант при отсутствии подвижных клеток в тестикулярном материале | Целостная мембрана, реакция на механическую стимуляцию, гипоосмотический тест или лазерную активацию |
| Неподвижный нежизнеспособный сперматозоид | Гиблая зрелая клетка | Для ИКСИ не используется | Отсутствие реакции, повреждение мембраны, признаки дегенерации |
| Круглая сперматида | Гаплоидная, n; незавершенная дифференцировка | Не является стандартным материалом; ROSI применяется только в исключительных случаях | Отсутствие зрелой структуры сперматозоида и низкая эффективность оплодотворения |
| Сперматоцит I порядка | До первого мейотического деления; 2n, 4C | Непригоден для стандартной ИКСИ | Диплоидный генетический набор и незавершенный мейоз |
| Сперматоцит II порядка | После первого мейотического деления; n, 2C | Непригоден для стандартной ИКСИ | Незавершенный мейоз и отсутствие свойств зрелого гамета |
Таким образом, при использовании тестикулярного материала решающим является не наличие движения, а доказанная жизнеспособность сперматозоида. Микроинъекция живой неподвижной клетки позволяет использовать собственный генетический материал пациента при тяжелой олигозооспермии или азооспермии. Выбор клеток более ранних стадий сперматогенеза не заменяет зрелый сперматозоид и связан с существенно меньшей эффективностью и дополнительными биологическими рисками.