2) разрешен при отсутствии эмбрионов, развившихся из зигот с двумя пронуклеусами
3) строго запрещен (+)
4) разрешен при наличии информированного согласия пациентки
Наличие четырёх пронуклеусов (4PN) при оценке оплодотворения относится к выраженно аномальной пронуклеарной конфигурации. Нормальное оплодотворение характеризуется формированием двух пронуклеусов — материнского и отцовского — обычно при наличии двух полярных телец. Появление четырёх пронуклеусов указывает на нарушение процесса оплодотворения или мейоза и ассоциируется с высоким риском полиплоидии и других грубых нарушений хромосомного набора; поэтому такой эмбрион не рассматривается как стандартно пригодный для переноса. ESHRE также относит наличие ≥3 пронуклеусов к аномальному оплодотворению.
Механизм формирования 4PN зависит от способа оплодотворения. После классического ЭКО возможной причиной является полиспермия — проникновение в ооцит более одного сперматозоида; после ИКСИ множественные пронуклеусы могут быть связаны с нарушением завершения мейоза, аномальным распределением генетического материала или особенностями патологического ооцита. Число пронуклеусов является ранним морфологическим маркером нормальности оплодотворения: последующее дробление и даже достижение стадии бластоцисты сами по себе не устраняют исходный риск генетической несбалансированности. Именно поэтому наличие информированного согласия пациентки или отсутствие нормальных 2PN-эмбрионов не превращает 4PN-эмбрион в приемлемый объект для стандартного переноса.
Современные исследования показывают, что морфологически атипичная пронуклеарная картина не во всех отдельных случаях абсолютно тождественна определённому кариотипу, однако эти наблюдения пока не являются основанием для рутинного клинического использования эмбрионов, развившихся из 4PN-зигот. Новые данные о генетическом тестировании атипично оплодотворённых эмбрионов рассматриваются преимущественно как предмет дальнейших исследований, тогда как для экзаменационного и стандартного клинико-эмбриологического подхода 4PN трактуется как патологический признак оплодотворения.
| Пронуклеарная картина | Интерпретация | Вероятный механизм | Клиническое значение |
|---|---|---|---|
| 0PN | Пронуклеусы при контрольной оценке не визуализируются | Отсутствие оплодотворения либо несвоевременная оценка после исчезновения PN | Требует осторожной интерпретации с учётом времени наблюдения и морфокинетики |
| 1PN | Атипичное оплодотворение | Партеногенетическая активация, асинхронное формирование/слияние PN или иные нарушения | Не соответствует классическому морфологическому критерию нормального оплодотворения |
| 2PN | Нормальная пронуклеарная конфигурация | Формирование материнского и отцовского пронуклеусов | Основной морфологический признак нормального оплодотворения и исходная группа для отбора эмбрионов |
| 3PN | Аномальное оплодотворение | Полиспермия при ЭКО либо нарушение экструзии второго полярного тельца, особенно после ИКСИ | Высокая вероятность триплоидии или иной генетической несбалансированности |
| 4PN | Выраженно аномальная пронуклеарная конфигурация | Полиспермия, нарушения мейоза или распределения генетического материала | Высокий риск полиплоидии; в стандартном подходе эмбрион исключают из переноса |
| ≥3PN | Общая категория мультипронуклеарных зигот | Нарушение нормального объединения двух гаплоидных геномов | Рассматривается как признак аномального оплодотворения; морфологически нормальное дальнейшее развитие не исключает хромосомной патологии |
Оценку оплодотворения проводят в строго определённое время, поскольку пронуклеусы являются транзиторными структурами и впоследствии исчезают перед первым митотическим делением. Поэтому достоверность заключения зависит не только от их количества, но и от правильного времени наблюдения, числа полярных телец и, при использовании time-lapse-систем, полной морфокинетической картины. Для практической эмбриологии ключевым ориентиром остаётся нормальная конфигурация 2PN; выраженное отклонение, такое как 4PN, служит основанием исключить эмбрион из стандартного клинического переноса. Такой подход направлен на минимизацию риска переноса эмбриона с грубым нарушением плоидности.