2) иголки для введения сперматозоида, холдинга и чашки для ИКСИ (+)
3) пипетки для биопсии и холдинга
4) иголки для введения сперматозоида и чашки для ИКСИ
Классическое интрацитоплазматическое введение сперматозоида требует трех обязательных компонентов: инъекционной иглы, удерживающей пипетки и специализированной чашки для ИКСИ. Удерживающая пипетка, соединенная с микроманипулятором, фиксирует зрелый ооцит в стабильном положении, обычно с расположением полярного тельца вне предполагаемой траектории прокола. Инъекционная игла служит для иммобилизации, аспирации и последующего введения одного морфологически отобранного сперматозоида непосредственно в цитоплазму ооцита.
В чашке для ИКСИ формируют отдельные микрокапли культуральной среды для ооцитов и вязкой среды, чаще с поливинилпирролидоном, предназначенной для замедления движения сперматозоидов и облегчения их отбора. После прохождения иглы через прозрачную оболочку и оолемму сперматозоид депонируют в ооплазму, а иглу осторожно извлекают. Отсутствие удерживающей пипетки не позволяет надежно стабилизировать ооцит, тогда как пипетки Пастера и биопсийные пипетки имеют другое назначение и не обеспечивают стандартное выполнение микроинъекции.
| Инструмент или подход | Основное назначение | Применимость при классическом ИКСИ |
|---|---|---|
| Инъекционная игла | Иммобилизация, аспирация и введение одного сперматозоида в цитоплазму ооцита | Обязательный компонент |
| Удерживающая пипетка | Фиксация и правильная ориентация ооцита во время прокола | Обязательный компонент |
| Чашка для ИКСИ | Размещение микрокапель среды для ооцитов и подготовки сперматозоидов | Необходима для организации процедуры |
| Пипетка Пастера | Перенос жидкостей или биологического материала без точной микроинъекции | Не заменяет инъекционную иглу |
| Биопсийная пипетка | Аспирация полярного тельца, бластомера или клеток трофэктодермы | Используется при преимплантационном генетическом тестировании, а не для ИКСИ |
| Инъекционная игла без холдинга | Позволяет манипулировать сперматозоидом, но не обеспечивает фиксацию ооцита | Не соответствует стандартной технике классического ИКСИ |
Эффективность и безопасность процедуры зависят не только от наличия инструментов, но и от точной настройки микроманипуляторов, контроля отрицательного и положительного давления, а также поддержания стабильной температуры и pH среды. Перед микроинъекцией ооциты освобождают от клеток кумулюса и подтверждают их зрелость по наличию первого полярного тельца. После ИКСИ оценивают выживаемость ооцита и признаки нормального оплодотворения — формирование двух пронуклеусов и двух полярных телец. Соблюдение стандартной техники снижает риск повреждения оолеммы, дегенерации ооцита и аномального оплодотворения.