2) нативной обработанной
3) донорской обработанной
4) размороженной обработанной
Внутриматочная инсеминация проводится только суспензией сперматозоидов, прошедшей лабораторную обработку. При этом удаляется большая часть семенной плазмы, эякулята, клеточного детрита, лейкоцитов и потенциальных микробных загрязнений; одновременно концентрируются наиболее подвижные и морфологически полноценные сперматозоиды. Поэтому введение нативной необработанной спермы в полость матки не соответствует стандартной технологии процедуры.
Семенная плазма содержит простагландины, цитокины и другие биологически активные компоненты, которые при внутриматочном введении могут вызвать выраженные сокращения миометрия, болезненность, вазовагальную реакцию и воспалительный ответ. Кроме того, необработанный эякулят имеет избыточный объём и содержит неподвижные сперматозоиды, лейкоциты и клеточные примеси, что повышает риск дискомфорта и инфекционных осложнений. Обработка обычно включает разжижение, центрифугирование с отмыванием, метод градиента плотности или swim-up и ресуспендирование фракции подвижных сперматозоидов в небольшом объёме культуральной среды.
Свежий эякулят после обработки, обработанный донорский материал и размороженная сперма после повторной обработки могут применяться при наличии соответствующих показаний и критериев безопасности. Для размороженного образца дополнительно оценивают постразморозочную концентрацию и прогрессивную подвижность, а также удаляют криопротектор и остатки повреждённых клеток. Таким образом, определяющим является не происхождение или способ хранения спермы, а обязательное удаление семенной плазмы и получение подготовленной фракции сперматозоидов.
| Вид материала | Лабораторная подготовка | Что оценивают | Возможность применения при ВМИ | Основное обоснование |
|---|---|---|---|---|
| Нативная необработанная сперма | Не проводится отмывание и выделение подвижной фракции | Оцениваются все компоненты эякулята без селекции | Не применяется | Семенная плазма, клеточный детрит и лейкоциты могут вызывать сокращения матки, боль и воспалительную реакцию |
| Свежая (нативная) сперма после обработки | Отмывание, центрифугирование, swim-up или градиент плотности, ресуспендирование | Концентрация и прогрессивная подвижность сперматозоидов, объём конечной суспензии | Применяется | Удаляется семенная плазма и концентрируется фракция функционально активных сперматозоидов |
| Донорская обработанная сперма | Предварительная криоконсервация с последующим размораживанием и подготовкой образца | Постразморозочная подвижность, инфекционная безопасность и соответствие требованиям банка | Применяется | После стандартной подготовки материал пригоден для внутриматочного введения |
| Размороженная обработанная сперма партнёра | Удаление криопротектора и семенной плазмы, выделение подвижных сперматозоидов | Жизнеспособность, концентрация и прогрессивная подвижность после размораживания | Применяется при достаточных показателях | Повторная обработка снижает содержание повреждённых клеток и остаточных компонентов среды замораживания |
| Конечная суспензия для ВМИ | Перенос в стерильную культуральную среду в малом объёме | Количество подвижных сперматозоидов, стерильность и отсутствие значимого клеточного дебриса | Является стандартной формой материала | Позволяет безопасно ввести селектированные сперматозоиды непосредственно в полость матки |
Ключевым критерием готовности материала является наличие достаточного числа прогрессивно подвижных сперматозоидов в очищенной суспензии. Внутриматочное введение необработанного эякулята следует отличать от иных способов инсеминации, не являющихся стандартной медицинской ВМИ. Перед процедурой также учитывают результаты инфекционного скрининга, срок хранения и показатели спермограммы. Поэтому правильным является выбор необработанной нативной спермы как материала, который нельзя использовать для клинической внутриматочной инсеминации.