2) выделение возбудителя в культуре клеток
3) иммуноферментный анализ (ИФА)
4) реакция прямой иммунофлюоресценции (РИФ)
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) относится к методам амплификации нуклеиновых кислот (NAAT) и позволяет обнаружить специфические участки ДНК Chlamydia trachomatis даже при небольшом количестве возбудителя в клиническом материале. Метод обладает высокой аналитической чувствительностью и специфичностью, быстро выполняется, может быть автоматизирован и не требует сохранения жизнеспособности микроорганизма. Поэтому в современных рекомендациях ВОЗ и рутинной диагностике урогенитального хламидиоза ПЦР рассматривается как наиболее информативный метод, соответствующий понятию золотого стандарта .
Для исследования используют первую порцию мочи, влагалищный или цервикальный мазок у женщин, уретральный мазок у мужчин; при соответствующем эпидемиологическом анамнезе исследуют также ректальные и фарингеальные образцы. Положительный результат свидетельствует о наличии генетического материала возбудителя и должен оцениваться с учётом клинических проявлений, локализации инфекции и качества забора материала. Отрицательный результат не исключает инфекцию при неправильном взятии образца, исследовании не из поражённого биотопа или проведении теста вскоре после инфицирования.
Культуральный метод исторически считался референсным, однако он требует жизнеспособных элементарных телец хламидий, специальных клеточных культур, сложной транспортировки и длительного выполнения; его чувствительность в реальной практике ниже. ИФА выявляет антиген, а реакция прямой иммунофлюоресценции зависит от качества мазка и квалификации специалиста, поэтому оба метода уступают ПЦР по чувствительности и воспроизводимости.
| Метод или диагностический этап | Что выявляет и принцип | Основное преимущество | Ограничения и диагностическая роль |
|---|---|---|---|
| ПЦР/NAAT | Специфические последовательности ДНК C. trachomatis после амплификации | Высокая чувствительность и специфичность, быстрый результат, возможность автоматизации | Не подтверждает жизнеспособность микроорганизма; остаточная ДНК может сохраняться после лечения |
| Выделение в культуре клеток | Размножение жизнеспособных хламидий в чувствительной клеточной культуре | Высокая специфичность, исторически использовалось как референсный метод | Требует специальных условий транспортировки и лаборатории, длительно, менее чувствительно при малом количестве возбудителя |
| ИФА | Антиген хламидий с помощью специфических антител и ферментной метки | Техническая доступность и относительная простота | Чувствительность недостаточна для надёжного исключения инфекции, особенно при низкой микробной нагрузке |
| Прямая иммунофлюоресценция | Антиген возбудителя в мазке, визуализируемый флуоресцентно мечеными антителами | Возможность непосредственной оценки клеточного материала | Результат зависит от качества мазка, количества антигена и опыта микроскописта; уступает NAAT по воспроизводимости |
| Оптимальный материал у женщин | Влагалищный или цервикальный мазок, при необходимости первая порция мочи | Высокая диагностическая информативность при правильном заборе | Исследование материала из неподходящей локализации повышает риск ложноотрицательного результата |
| Оптимальный материал у мужчин | Первая порция мочи или уретральный мазок; при экстрагенитальном контакте — мазок из соответствующей зоны | Позволяет выявлять инфекцию даже при отсутствии выраженного уретрита | Результат зависит от соблюдения правил подготовки и времени после последнего мочеиспускания |
Лабораторное подтверждение должно сочетаться с оценкой сексуального анамнеза, симптомов и возможных сочетанных инфекций, прежде всего гонококковой. При выявлении хламидийной инфекции необходимы лечение пациента и обследование половых партнёров в соответствии с клиническими рекомендациями. Контрольный тест после терапии выполняют по показаниям, поскольку слишком раннее проведение ПЦР может выявить сохраняющиеся фрагменты ДНК и не свидетельствует о неэффективности лечения. Для профилактики повторного заражения рекомендуется повторное обследование через несколько месяцев.