2) разделения компонентов анализируемой смеси
3) регистрации выхода пробы из колонки (+)
4) термостатирования колонки
Детектор устанавливается после хроматографической колонки и регистрирует появление компонентов в элюате — потоке подвижной фазы, выходящем из колонки. При прохождении вещества через измерительную ячейку изменяется определённое физическое или физико-химическое свойство системы: оптическая плотность, интенсивность флуоресценции, показатель преломления, электропроводность или ток ионизации. Детектор преобразует это изменение в электрический сигнал, который формирует хроматограмму в виде пиков, соответствующих выходу отдельных компонентов.
Разделение веществ происходит преимущественно в хроматографической колонке за счёт различий в их взаимодействии с неподвижной и подвижной фазами. Термостатирование относится к функции термостата или печи колонки и обеспечивает стабильность температуры, а расчёт относительных параметров удерживания выполняется по данным хроматограммы, зарегистрированным детектором. Поэтому непосредственная функция детектора — фиксировать момент и интенсивность выхода вещества из колонки, что позволяет проводить как качественную, так и количественную оценку анализа.
Тип детектора выбирают с учётом химической природы анализируемых соединений, требуемой чувствительности и селективности метода. Универсальные детекторы реагируют на широкий круг веществ, тогда как селективные позволяют надёжнее определять целевые компоненты в сложных лекарственных и биологических матрицах.
| Тип детектора | Регистрируемое свойство | Основная область применения | Особенности |
|---|---|---|---|
| Ультрафиолетовый/видимый спектрофотометрический | Поглощение излучения определённой длины волны | Высокоэффективная жидкостная хроматография лекарственных веществ с хромофорными группами | Хорошая воспроизводимость; непригоден для соединений, практически не поглощающих УФ-излучение |
| Флуориметрический | Интенсивность флуоресценции | Определение флуоресцирующих веществ и производных после дериватизации | Высокая чувствительность и селективность, но ограниченная область применимости |
| Рефрактометрический | Изменение показателя преломления элюата | Анализ сахаров, полимеров и соединений без выраженного УФ-поглощения | Практически универсален, однако чувствителен к колебаниям температуры и состава подвижной фазы |
| Пламенно-ионизационный | Ток ионизации органических соединений в пламени | Газовая хроматография летучих органических веществ | Широкий динамический диапазон и высокая чувствительность к углеводородам |
| Электрохимический | Ток окисления или восстановления аналита | Определение электроактивных соединений, включая отдельные лекарственные вещества и метаболиты | Высокая чувствительность; результат зависит от потенциала электрода и состава среды |
| Масс-спектрометрический | Отношение массы иона к его заряду и интенсивность ионного сигнала | Подтверждение структуры и высокоселективное определение компонентов сложных смесей | Сочетает регистрацию выхода вещества с возможностью молекулярной идентификации |
Без детектора разделённые в колонке компоненты не формируют измеряемую хроматографическую запись. Положение пика по времени удерживания используют для идентификации, а его площадь или высоту — для количественного определения при соблюдении условий градуировки. Таким образом, детектор является регистрирующим блоком, завершающим аналитический процесс после разделения компонентов.