2) метод перегонки с водяным паром
3) перманганатометрию
4) спектрофотометрию (+)
Для количественной оценки анtragликозидов в лекарственном растительном сырье применяют спектрофотометрический метод, поскольку соединения антрахинонового ряда обладают выраженной хромофорной системой и поглощают ультрафиолетовое или видимое излучение. После экстракции, а в зависимости от требований нормативной документации — также после гидролиза гликозидов и перевода образующихся агликонов в щелочную среду, регистрируют оптическую плотность раствора при установленной длине волны. Концентрацию рассчитывают по градуировочному графику либо относительно стандартного образца; результат обычно выражают в пересчёте на определённое маркерное соединение или сумму антраценпроизводных.
Аналитической основой метода является закон Бугера—Ламберта—Бера: при соблюдении условий измерения оптическая плотность пропорциональна концентрации окрашенного или поглощающего компонента. Щелочная среда способствует образованию окрашенных фенолятных форм антрахинонов, что повышает чувствительность определения. Спектрофотометрия особенно удобна для сырья, содержащего комплекс близких по строению антраценпроизводных, поскольку позволяет оценивать их суммарное содержание, тогда как гравиметрия и титриметрические методы обладают меньшей специфичностью.
| Метод | Аналитический принцип | Типичные объекты | Оценка пригодности для анtragликозидов |
|---|---|---|---|
| Спектрофотометрия | Измерение поглощения УФ- или видимого излучения хромофорной системой антрахинонов | Сенны, крушины, ревеня и другое сырьё с антраценпроизводными | Основной метод количественного определения суммы; чувствителен и технологически удобен |
| Гравиметрия | Выделение, высушивание и взвешивание общего осадка или фракции веществ | Соединения, образующие чистый и полно осаждаемый продукт | Низкая специфичность и значительные потери при выделении; для анtragликозидов обычно не является предпочтительным |
| Перегонка с водяным паром | Отгонка летучих компонентов с последующей конденсацией | Эфирные масла и другие летучие вещества | Непригодна для нелетучих полярных гликозидов |
| Перманганатометрия | Окислительно-восстановительное титрование перманганатом | Восстановители с выраженной стехиометричной реакцией окисления | Недостаточная селективность в многокомпонентном растительном экстракте; возможны побочные окислительные реакции |
| Тонкослойная хроматография | Разделение компонентов и сравнение зон по цвету или интенсивности | Идентификация отдельных антраценпроизводных | В основном качественный или полуколичественный метод; может использоваться как подтверждающий |
| ВЭЖХ | Хроматографическое разделение с детектированием, чаще УФ- или диодно-матричным | Отдельные гликозиды и агликоны сложного состава | Высокоспецифичный метод, но требует более сложного оборудования и стандартизации |
При проведении анализа необходимо учитывать полноту экстракции, стабильность окрашенных форм, влияние рН и наличие сопутствующих фенольных соединений. Методика должна быть валидирована по специфичности, линейности, правильности, прецизионности и пределу обнаружения. Выражение результата в пересчёте на стандартное соединение не означает присутствия в сырье только этого вещества, а характеризует суммарное содержание группы антраценпроизводных. содержание