2) тонкослойной хроматографии
3) рефрактометрии
4) поляриметрии
Для контроля остаточных органических растворителей в фармацевтических субстанциях применяют газовую хроматографию, поскольку большинство таких соединений летучи и способны переходить в газовую фазу без разложения. В хроматографической колонке компоненты разделяются по различию летучести и взаимодействия с неподвижной фазой, после чего регистрируются детектором, чаще пламенно-ионизационным (ПИД) или масс-спектрометрическим. Количественное содержание определяют сравнением площадей пиков исследуемого раствора и стандартов либо использованием внутреннего стандарта.
На практике широко используется газовая хроматография с парофазным вводом (headspace GC). При таком подходе анализируется газовая фаза над образцом, что уменьшает влияние нелетучей матрицы субстанции, защищает колонку и повышает воспроизводимость определения. Метод позволяет одновременно идентифицировать растворители по времени удерживания и оценивать их концентрацию с чувствительностью, соответствующей фармакопейным требованиям и руководству ICH Q3C.
Тонкослойная хроматография преимущественно пригодна для качественного или полуколичественного анализа и недостаточно точна для контроля низких концентраций летучих примесей. Рефрактометрия и поляриметрия измеряют суммарные физические свойства раствора и не обеспечивают селективного разделения и идентификации отдельных растворителей; на результаты также существенно влияет состав матрицы.
| Объект или подход | Основная характеристика | Аналитическое значение |
|---|---|---|
| Остаточные органические растворители | Летучие органические соединения, сохранившиеся после синтеза, экстракции, очистки или сушки субстанции | Подлежат идентификации и количественному контролю из-за токсикологических и технологических рисков |
| Газовая хроматография | Разделение летучих веществ в капиллярной или насадочной колонке с последующей детекцией | Основной селективный и количественный метод фармакопейного контроля |
| Headspace GC | Вводится паровая фаза над образцом после термостатирования во флаконе | Снижает влияние нелетучих компонентов субстанции и подходит для многокомпонентного анализа |
| Растворители класса 1 по ICH Q3C | Растворители с высокой токсичностью или неблагоприятным воздействием на окружающую среду; например бензол и 1,2-дихлорэтан | Их применение следует избегать; при возможном присутствии требуется особо строгий контроль |
| Растворители класса 2 по ICH Q3C | Растворители с установленными предельными суточными воздействиями; например метанол, ацетонитрил, толуол | Оцениваются количественно с учетом индивидуального допустимого предела для каждого вещества |
| Растворители класса 3 по ICH Q3C | Растворители с низким токсикологическим потенциалом при остаточном содержании в допустимых пределах; например этанол, ацетон, этилацетат | Обычно контролируются по суммарному содержанию или установленному нормативу, если это предусмотрено спецификацией |
| Тонкослойная хроматография, рефрактометрия и поляриметрия | Не обеспечивают достаточной селективности и чувствительности для надежного определения индивидуальных летучих примесей | Могут иметь вспомогательное значение, но не заменяют газовую хроматографию при количественном контроле остаточных растворителей |
Результаты анализа должны соответствовать нормативам фармакопейной статьи или утвержденной спецификации на субстанцию. При разработке методики подтверждают специфичность, линейность, точность, прецизионность, предел обнаружения и предел количественного определения. Выбор условий термостатирования, колонки и детектора зависит от предполагаемого перечня растворителей и состава матрицы. Таким образом, газовая хроматография обеспечивает одновременно разделение, идентификацию и достоверное количественное определение остаточных растворителей.