2) тимоловый синий
3) крахмал
4) метиловый красный
Количественное определение никотинамида по методике Государственной фармакопеи РФ XIV издания выполняют методом неводного кислотно-основного титрования. В среде безводной уксусной кислоты никотинамид, содержащий пиридиновый атом азота, протонируется perchлорной кислотой с образованием соли никотинамида перхлората. Соотношение реагирующих веществ является стехиометрическим, поэтому объём титранта используют для расчёта содержания действующего вещества.
Кристаллический фиолетовый выбран как индикатор, поскольку его цветовой переход хорошо проявляется в неводной уксуснокислой среде в области эквивалентности: окраска изменяется от фиолетовой через синюю к сине-зелёной или зелёной при появлении небольшого избытка кислоты. Тимоловый синий и метиловый красный предназначены преимущественно для водных кислотно-основных титрований, а их интервалы перехода не соответствуют условиям данной методики. Крахмал применяют главным образом в йодометрии для обнаружения избытка йода, поэтому при определении никотинамида он химически и методически не обоснован.
| Элемент методики | Характеристика | Аналитическое значение |
|---|---|---|
| Метод анализа | Неводное кислотно-основное титрование | Позволяет количественно определить слабое основание, титрование которого в воде может быть недостаточно чётким |
| Определяемое соединение | Никотинамид — производное пиридина с основным атомом азота кольца | Способен связывать протон и реагировать с сильной кислотой в подходящей неводной среде |
| Титрант | Раствор перхлорной кислоты в безводной уксусной кислоте | Обеспечивает количественное протонирование никотинамида и фиксированную стехиометрию реакции |
| Растворитель | Безводная уксусная кислота, при необходимости в сочетании с уксусным ангидридом | Повышает выраженность кислотно-основного взаимодействия и уменьшает влияние воды |
| Кристаллический фиолетовый | Индикатор неводного кислотно-основного титрования | Даёт отчётливый переход окраски вблизи точки эквивалентности; является фармакопейным индикатором для данной методики |
| Крахмал | Индикатор йодометрических реакций | Образует окрашенный комплекс с йодом, но не фиксирует эквивалентность при титровании никотинамида перхлорной кислотой |
| Тимоловый синий и метиловый красный | Индикаторы водных кислотно-основных титрований с определёнными диапазонами перехода окраски | В неводной уксуснокислой среде не обеспечивают предусмотренной фармакопеей точности и воспроизводимости конечной точки |
Следовательно, правильный выбор индикатора определяется не только его способностью изменять окраску, но и соответствием растворителю, силе титранта и природе анализируемого вещества. Кристаллический фиолетовый позволяет визуально зарегистрировать момент нейтрализации основных центров никотинамида. Результат титрования может быть пересчитан на массу никотинамида с использованием молярной концентрации перхлорной кислоты и установленного стехиометрического коэффициента. Нарушение безводности среды способно сместить конечную точку и ухудшить точность количественного анализа.