2) желатина (+)
3) железа III аммония сульфата
4) основного ацетата свинца
Реакция с раствором желатина считается одной из наиболее специфичных качественных реакций на дубильные вещества, поскольку основана на их характерной способности связываться с белками и вызывать их осаждение. Дубильные вещества содержат многочисленные фенольные гидроксильные группы, которые взаимодействуют с пептидными группами и боковыми цепями белковых молекул преимущественно за счёт водородных связей и гидрофобных взаимодействий. При добавлении раствора желатина к извлечению, содержащему достаточное количество таннинов, образуется нерастворимый комплекс таннин–белок , проявляющийся помутнением или выпадением осадка.
Диагностическая ценность этой реакции связана с тем, что способность осаждать белки лежит в основе самого фармакогностического понятия дубильных веществ и их вяжущего действия. Реакции с солями железа(III) также широко применяют для обнаружения фенольных соединений: гидролизуемые и конденсированные дубильные вещества дают различное окрашивание, однако аналогичные цветные комплексы способны образовывать и другие полифенолы. Основной ацетат свинца вызывает осаждение многих фенольных соединений и органических кислот, поэтому также уступает желатиновой пробе по специфичности.
Формальдегид применяется преимущественно в реакциях, позволяющих дифференцировать отдельные группы дубильных веществ, особенно конденсированные таннины, способные к реакциям конденсации. Следовательно, желатиновая проба наиболее непосредственно воспроизводит ключевое физико-химическое свойство таннинов — образование малорастворимых комплексов с белками, что и определяет её высокую специфичность при фармакогностическом анализе.
| Реактив или метод | Наблюдаемый эффект | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Раствор желатина | Помутнение или выпадение осадка белково-таннинового комплекса | Высокоспецифичная реакция, основанная на способности дубильных веществ осаждать белки |
| Соли железа(III) | Сине-чёрное, синее или зеленоватое окрашивание | Чувствительная реакция на фенольные гидроксильные группы, но менее специфичная для таннинов |
| Основной ацетат свинца | Образование осадка | Может выявлять различные полифенолы и некоторые другие органические соединения |
| Формальдегид в кислой среде | Конденсация и выпадение производных некоторых таннинов | Используется преимущественно для дифференциации конденсированных дубильных веществ |
| Гидролизуемые дубильные вещества | При гидролизе образуют галловую или эллаговую кислоту и углеводный компонент | Отличаются по строению и характеру цветных реакций с солями железа(III) |
| Конденсированные дубильные вещества | Не расщепляются обычным гидролизом; при кислотном воздействии могут образовывать антоцианидины | Имеют особенности реакций с формальдегидом и солями железа(III) |
Белокосаждающая способность дубильных веществ имеет не только аналитическое, но и фармакологическое значение. Связывание таннинов с белками поверхностных слоёв тканей приводит к формированию защитной плёнки и лежит в основе их вяжущего действия. В фармакогностическом анализе качественные реакции обычно сочетают с хроматографическими и количественными методами, поскольку отдельная проба не позволяет полноценно охарактеризовать состав растительного сырья. Желатиновая реакция особенно полезна для подтверждения принадлежности выявленных полифенольных соединений к веществам, обладающим выраженной таннирующей способностью.