2) площадь пиков
3) концентрация компонента пробы
4) кажущееся число теоретических тарелок (+)
Кажущееся число теоретических тарелок характеризует эффективность разделения в системе капиллярного электрофореза. Показатель отражает способность системы формировать узкие, хорошо очерченные зоны анализируемых веществ при заданном времени миграции: чем выше его значение, тем меньше дисперсия зоны и тем выше эффективность разделения. Обычно параметр рассчитывают по соотношению времени миграции и ширины пика, например по формуле N = 5,54 × (tm/w0,5)2, где tm — время миграции, а w0,5 — ширина пика на половине высоты.
Термин кажущееся используется потому, что в капилляре отсутствуют реальные теоретические тарелки, характерные для классической модели хроматографической колонки. Показатель представляет собой расчетную характеристику, на которую влияют электрофоретическая подвижность вещества, электроосмотический поток, напряженность электрического поля, температура, состав фонового электролита и процессы уширения зоны. Площадь пика преимущественно применяется для количественного определения, концентрация относится к характеристикам исследуемой пробы, а ширина пика сама по себе менее информативна, поскольку не учитывает время миграции.
| Параметр | Что характеризует | Значение для оценки системы |
|---|---|---|
| Кажущееся число теоретических тарелок | Эффективность разделения и степень уширения зоны | Основной расчетный критерий пригодности системы |
| Разрешение пиков | Степень разделения двух соседних компонентов | Подтверждает возможность их раздельной идентификации и количественного определения |
| Время миграции | Скорость перемещения компонента к детектору | Используется для идентификации и контроля воспроизводимости |
| Ширина пика | Дисперсию электрофоретической зоны | Входит в расчет эффективности, но отдельно не учитывает время миграции |
| Площадь пика | Количество зарегистрированного анализируемого вещества | Применяется преимущественно в количественном анализе |
| Относительное стандартное отклонение | Повторяемость времени миграции или площади пика | Показывает стабильность последовательных измерений |
| Отношение сигнал/шум | Чувствительность регистрации малых концентраций | Особенно важно при контроле примесей и пределов обнаружения |
Достаточное значение кажущегося числа теоретических тарелок подтверждает, что капилляр, электролит, температурный режим и электрическое поле обеспечивают требуемую эффективность анализа. Снижение показателя может быть связано с загрязнением внутренней поверхности капилляра, нестабильностью электроосмотического потока, перегрузкой пробы или нарушением термостатирования. Критерий оценивают совместно с разрешением, повторяемостью времени миграции и количественного отклика. Такой комплексный контроль позволяет подтвердить пригодность системы до анализа лекарственного средства или фармацевтической субстанции.