2) образование окрашенного растворимого (+)
3) образование бесцветного малорастворимого
4) растворение малорастворимого
Фотометрической называют химическую реакцию, в результате которой образуется окрашенное растворимое соединение — обычно комплекс, продукт окислительно-восстановительного превращения или органический краситель. Возникающий хромофор поглощает свет в ультрафиолетовой или видимой области спектра, а интенсивность поглощения регистрируют фотометрически. В фармацевтическом анализе по величине оптической плотности судят о наличии вещества или определяют его концентрацию.
Окраска должна быть достаточно устойчивой и воспроизводимой, а её интенсивность — зависеть от содержания определяемого компонента. При соблюдении закона Бугера—Ламберта—Бера оптическая плотность прямо пропорциональна концентрации окрашенного вещества и длине оптического пути. Примерами являются образование красного тиоцианатного комплекса железа(III), азокрасителя при диазотировании и реакции азосочетания, а также окрашенных продуктов окисления отдельных лекарственных веществ.
Ключевым аналитическим признаком является появление однородной окраски раствора, а не выделение газа, образование бесцветного осадка или простое растворение исходного вещества. Перед измерением учитывают холостую пробу, выбирают аналитическую длину волны, при которой поглощение максимально, и используют градуировочную зависимость либо стандартный раствор. Поэтому образование окрашенного растворимого соединения является сущностью фотометрической реакции.
| Вид реакции или метода | Результат превращения | Регистрируемый аналитический сигнал | Типичное применение |
|---|---|---|---|
| Фотометрическая | Окрашенное растворимое соединение | Поглощение света, оптическая плотность | Определение концентрации и идентификация лекарственных веществ |
| Комплексообразовательная фотометрическая | Растворимый окрашенный координационный комплекс иона металла | Интенсивность окраски комплекса | Определение железа, меди, кобальта и других ионов |
| Окислительно-восстановительная фотометрическая | Окрашенный продукт реакции окисления или восстановления | Изменение спектра поглощения | Анализ веществ, способных участвовать в редокс-превращениях |
| Нефелометрическая | Взвешенные частицы или малорастворимый осадок | Светорассеяние суспензией | Определение низких концентраций веществ по интенсивности рассеянного света |
| Турбидиметрическая | Мутная суспензия или осадок | Ослабление проходящего светового потока | Оценка содержания вещества по степени помутнения раствора |
| Гравиметрическая осадительная | Малорастворимое, часто бесцветное соединение | Масса высушенного или прокалённого осадка | Количественное определение по массе продукта реакции |
| Газометрическая | Газообразный продукт | Объём, давление или количество выделившегося газа | Анализ карбонатов, гидрокарбонатов и других газообразующих систем |
Фотометрический анализ требует контроля pH, времени развития окраски, температуры и соотношения реагентов, поскольку эти факторы влияют на полноту образования окрашенного соединения. Важны также специфичность реакции и отсутствие веществ, поглощающих свет на выбранной длине волны. Если продукт малорастворим или реакция сопровождается преимущественно рассеянием света, применяют нефелометрию или турбидиметрию, а не классическую фотометрию раствора.