2) этинилэстрадиола
3) тестостерона пропионата (+)
4) эстрадиола дипропионата
Реакция образования фенилгидразона основана на взаимодействии фенилгидразина с альдегидной или кетонной карбонильной группой с отщеплением воды и формированием производного типа C=N–NH–C6H5. Для тестостерона пропионата диагностически значимой является сохранённая 3-кетогруппа в положении C3 стероидного ядра. Пропионилирование 17β-гидроксильной группы изменяет фармакокинетические свойства вещества, но не устраняет 3-оксо-функцию, поэтому препарат способен давать характерный фенилгидразон.
Образование производного обычно сопровождается появлением окраски или осадка, что используют как качественный признак подлинности после проведения реакции в регламентированных условиях. Остальные перечисленные стероиды не имеют свободной альдегидной или кетонной группы: у метиландростендиола и этинилэстрадиола присутствуют гидроксильные функции, а у эстрадиола дипропионата гидроксилы этерифицированы. Карбонильные группы сложноэфирных фрагментов пропионата не обладают такой реакционной способностью в стандартной реакции образования фенилгидразонов, поэтому они не определяют положительный результат.
| Соединение или критерий | Функциональная группа, важная для реакции | Ожидаемый результат с фенилгидразином | Значение для подтверждения подлинности |
|---|---|---|---|
| Тестостерона пропионат | Стероидная 3-кетогруппа; 17β-гидроксил этерифицирован пропионовой кислотой | Образование фенилгидразона, возможное появление окрашенного осадка | Положительная качественная реакция на сохранённую кетонную группу |
| Метиландростендиол | Преимущественно гидроксильные группы; свободная альдегидная или кетонная группа отсутствует | Специфическое образование фенилгидразона не ожидается | Реакция не является подтверждающей для данного вещества |
| Этинилэстрадиол | Фенольная и спиртовая гидроксильные группы, этинильный заместитель | Фенилгидразон не образуется | Отрицательный результат обусловлен отсутствием карбонильной группы альдегидного или кетонного типа |
| Эстрадиола дипропионат | Две сложноэфирные группы пропионата; свободных гидроксилов нет | Эфирные карбонилы в обычных условиях не дают реакции фенилгидразона | Наличие сложного эфира не следует ошибочно трактовать как наличие реакционноспособной кетогруппы |
| Альдегиды и кетоны | Свободная группа >C=O или –CHO | Конденсация с фенилгидразином с образованием гидразона | Общий химический принцип качественной идентификации карбонильных соединений |
| Сложные эфиры | Группа –COOR | В стандартной пробе фенилгидразон не образуется | Карбонильный атом сложного эфира недостаточно реакционноспособен для данной диагностической реакции |
Таким образом, диагностический маркер тестостерона пропионата — не пропионатный остаток, а сохраняющаяся 3-кетогруппа стероидного ядра. Реакцию следует оценивать вместе с нормативными условиями методики, поскольку результат зависит от растворителя, температуры и времени взаимодействия. Для окончательной фармакопейной идентификации качественную реакцию целесообразно сочетать с инструментальными методами, например инфракрасной спектроскопией или хроматографией.