2) высокоэффективной жидкостной хроматографией (+)
3) спектрофотометрическим методом
4) титриметрическим методом
Для стандартизации сырья родиолы розовой (Rhodiola rosea L.) основными маркерными соединениями служат фенилпропаноидные гликозиды — розавин, розарин и розин, обычно учитываемые как сумма розавинов, — а также фенилэтаноидный гликозид салидрозид. Высокоэффективная жидкостная хроматография позволяет разделить эти вещества в экстракте, идентифицировать их по времени удерживания и спектральным характеристикам относительно стандартных образцов, а затем рассчитать содержание по площади хроматографических пиков и калибровочной зависимости. При использовании диодно-матричного или ультрафиолетового детектора возможно одновременное определение нескольких маркерных компонентов.
Преимущество ВЭЖХ заключается в высокой специфичности и селективности метода: количественно оцениваются именно индивидуальные биологически активные соединения, а не суммарная масса экстрактивных веществ. Гравиметрия характеризует общий сухой остаток, спектрофотометрия чаще отражает суммарное содержание соединений с определёнными хромофорными группами и может зависеть от матричных примесей, а титриметрия пригодна лишь для веществ или функциональных групп, вступающих в стехиометрическую реакцию. Поэтому для подтверждения подлинности и оценки качества сырья родиолы розовой предпочтительно применять валидированную ВЭЖХ-методику с контролем специфичности, линейности, точности и воспроизводимости.
| Объект контроля | Химическая характеристика | Значение для стандартизации | Критерий оценки методом ВЭЖХ |
|---|---|---|---|
| Розавин | Фенилпропаноидный гликозид | Один из основных маркерных компонентов корневищ и корней | Идентификация по времени удерживания и количественный расчёт по площади пика |
| Розарин | Фенилпропаноидный гликозид | Входит в профиль характерных соединений родиолы | Раздельное определение в хроматографическом профиле |
| Розин | Фенилпропаноидный гликозид | Учитывается при расчёте суммы розавинов | Сопоставление пика со стандартом и суммирование нормируемых компонентов |
| Салидрозид | Фенилэтаноидный гликозид | Самостоятельный фармакопейно значимый маркер сырья | Определение концентрации по индивидуальной калибровочной зависимости |
| Тирозол | Фенольное соединение, агликон салидрозида | Дополнительный показатель химического профиля и степени гидролиза | Выявление и количественная оценка при включении в валидированную методику |
| Спектрофотометрия | Суммарная оценка поглощающих свет соединений | Может использоваться как ориентировочный или общий количественный показатель | Недостаточная селективность для раздельного определения розавинов и салидрозида |
| Гравиметрия и титриметрия | Общая масса экстрактивных веществ или содержание титруемых групп | Вспомогательная оценка качества, но не специфическая стандартизация маркеров | Не позволяют надёжно установить индивидуальный состав комплекса биологически активных веществ |
Хроматографический профиль одновременно подтверждает химическую подлинность сырья и позволяет выявить его неполноценность либо фальсификацию. Количественные результаты выражают в пересчёте на сухое сырьё или сухой экстракт с учётом влажности и условий пробоподготовки. Достоверность заключения обеспечивается использованием аттестованных стандартных образцов и соблюдением требований фармакопейной или иной валидированной методики.