2) оптическая плотность – концентрация
3) пропускание – волновое число
4) оптическая плотность – длина волны (+)
УФ-спектр поглощения представляет собой зависимость оптической плотности, или абсорбции A, от длины волны падающего излучения λ, обычно выраженной в нанометрах. По оси абсцисс откладывают длину волны, а по оси ординат — оптическую плотность. Такое представление позволяет выявлять максимумы и минимумы поглощения, характерные для электронных переходов в хромофорных группах молекулы.
Оптическая плотность связана с концентрацией анализируемого вещества законом Бугера — Ламберта — Бера: A = εlc, где ε — молярный коэффициент поглощения, l — толщина поглощающего слоя, c — концентрация раствора. Однако концентрация не является независимой координатой при регистрации спектра: во время спектрального сканирования она остаётся постоянной, а изменяется длина волны. Положение максимумов поглощения используют для идентификации лекарственных веществ, а величину оптической плотности при выбранной длине волны — для их количественного определения.
| Параметр или подход | Характеристика | Аналитическое значение |
|---|---|---|
| Длина волны, λ | Независимая переменная спектра, обычно измеряется в нанометрах | Определяет энергетический диапазон электронных переходов |
| Оптическая плотность, A | Логарифмическая мера ослабления излучения: A = lg(I0/I) | Применяется для качественного и количественного анализа |
| Пропускание, T | Отношение интенсивности прошедшего света к интенсивности падающего света | Может регистрироваться прибором, но для аналитических расчётов обычно преобразуется в оптическую плотность |
| Максимум поглощения, λmax | Длина волны, при которой оптическая плотность достигает наибольшего значения | Служит идентификационным признаком и повышает чувствительность количественного определения |
| Зависимость A–c | Градуировочная зависимость оптической плотности от концентрации при постоянной длине волны | Используется для количественного анализа, но не является УФ-спектром |
| Волновое число | Величина, обратная длине волны, обычно выражаемая в см−1 | Наиболее характерно используется при представлении инфракрасных спектров |
УФ-спектрофотометр последовательно изменяет длину волны монохроматического излучения и измеряет степень его поглощения раствором. Полученная спектральная кривая отражает строение хромофоров, степень сопряжения и влияние заместителей в молекуле. Для фармакопейной идентификации оценивают положение максимумов, форму спектра и иногда отношение оптических плотностей при нескольких длинах волн. Количественное определение проводят при фиксированной аналитической длине волны, чаще всего соответствующей λmax.