2) относительное время удерживания одного вещества относительно другого
3) время, необходимое для элюирования вещества (+)
4) время до момента записи вершины пика за вычетом времени элюирования несорбируемого вещества
Временем удерживания называют интервал от момента введения пробы в хроматографическую систему до регистрации максимума пика данного вещества. Поэтому правильным является определение как времени, необходимого для элюирования анализируемого соединения: практически оно фиксируется по положению вершины пика на хроматограмме. Этот показатель характеризует, насколько быстро вещество проходит колонку при заданных условиях анализа.
В основе времени удерживания лежит распределение вещества между подвижной и неподвижной фазами. Чем сильнее соединение взаимодействует с сорбентом — за счёт адсорбции, распределения, ионного обмена или иных механизмов, — тем дольше оно задерживается в колонке и тем больше его время удерживания. На величину показателя влияют природа и полярность фаз, состав элюента, температура, скорость потока и свойства самого аналита.
Время прохождения несорбируемого вещества соответствует мёртвому, или холостому, времени системы. Разность между временем удерживания и мёртвым временем представляет собой скорректированное время удерживания, а отношение времён удерживания двух соединений — относительное время удерживания. Таким образом, эти величины связаны с временем удерживания, но не являются его прямым определением.
| Показатель | Обозначение | Содержание | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Время удерживания | tR | Время от ввода пробы до вершины пика вещества | Используется для идентификации соединения и оценки его элюирования |
| Мёртвое время | tM | Время прохождения вещества, практически не взаимодействующего с неподвижной фазой | Характеризует объём и скорость прохождения подвижной фазы через систему |
| Скорректированное время удерживания | t′R | Разность tR − tM | Отражает собственный вклад взаимодействия аналита с сорбентом |
| Относительное время удерживания | RRT | Отношение времени удерживания анализируемого вещества к времени удерживания вещества сравнения | Повышает сопоставимость результатов при изменении условий анализа |
| Коэффициент удерживания | k | Отношение скорректированного времени удерживания к мёртвому времени: k = (tR − tM)/tM | Количественно характеризует степень задерживания вещества в колонке |
| Селективность разделения | α | Отношение коэффициентов удерживания двух веществ, обычно α = k2/k1 | Показывает различие взаимодействия соединений с неподвижной фазой |
На практике время удерживания оценивают только при строго заданных условиях хроматографирования, поскольку его изменение может быть связано не только с природой вещества, но и с работой прибора. Для подтверждения идентификации используют стандартный образец, относительное время удерживания и, при необходимости, спектральные или химические детекторы. Надёжное разделение требует различий во взаимодействии компонентов с неподвижной фазой и достаточного разрешения соседних пиков.