2) мёртвым временем (+)
3) относительным временем удерживания
4) абсолютным временем удерживания
Мёртвое время (tM или t0) — это интервал прохождения через хроматограф вещества, которое практически не взаимодействует с неподвижной фазой и движется вместе с подвижной фазой. Поэтому максимум его сигнала соответствует времени прохождения элюента через свободный объём колонки и соединительные линии до детектора. Эта величина характеризует холостой ход системы и используется как исходная точка для оценки удерживания компонентов.
Вещество, взаимодействующее с неподвижной фазой, регистрируется позже: его абсолютное время удерживания tR складывается из мёртвого времени и дополнительной задержки вследствие сорбции, распределения или иных межфазных взаимодействий. Для исключения влияния времени прохождения подвижной фазы рассчитывают исправленное время удерживания: t′R = tR − tM. Следовательно, описанный в задании интервал соответствует именно мёртвому времени.
| Показатель | Обозначение | Определение | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Мёртвое время | tM, t0 | Время прохождения несорбирующегося вещества от ввода до максимума сигнала | Характеризует холостой объём и скорость перемещения подвижной фазы |
| Абсолютное время удерживания | tR | Время от ввода пробы до максимума пика определяемого компонента | Используется для идентификации, но зависит от параметров системы и потока |
| Исправленное время удерживания | t′R | Разность между абсолютным и мёртвым временем: tR − tM | Отражает время взаимодействия вещества с неподвижной фазой |
| Относительное время удерживания | RRT | Отношение времени удерживания аналита к времени удерживания стандартного вещества | Повышает сопоставимость результатов при анализе и идентификации |
| Несорбирующийся маркер | — | Соединение, не задерживающееся неподвижной фазой и движущееся с элюентом | Применяется для экспериментального определения tM |
| Коэффициент удерживания | k′ | Отношение дополнительного времени удерживания к мёртвому времени: k′ = (tR − tM)/tM | Количественно характеризует степень задержки аналита колонкой |
Мёртвое время зависит от объёма колонки, внутреннего диаметра капилляра, скорости потока и температуры, поэтому его определяют в конкретных условиях анализа. При изменении этих параметров могут смещаться времена выхода всех пиков, тогда как использование исправленного или относительного времени улучшает сопоставимость хроматограмм. В методиках фармацевтического анализа контроль времени удерживания и эффективности колонки помогает подтвердить пригодность хроматографической системы.