2) ПЦР IS6110 является положительной (+)
3) среда в пробирке является прозрачной
4) иммунохроматографический тест является отрицательным
Положительный результат ПЦР с праймерами к последовательности IS6110 подтверждает присутствие ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса даже при одновременном росте неспецифической микрофлоры. IS6110 — видоспецифичный для представителей комплекса M. tuberculosis транспозируемый элемент, обычно представленный в геноме в нескольких копиях. Поскольку неспецифические бактерии не содержат данного мишенного участка, их присутствие не приводит к ложноположительной реакции при корректно выполненной ПЦР.
Рост на кровяном агаре при смешанной культуре, напротив, может быть обусловлен контаминирующей неспецифической флорой, поэтому отрицательный результат не является закономерным. Помутнение жидкой среды также чаще отражает размножение сопутствующих быстрорастущих микроорганизмов и не служит признаком отсутствия микобактерий. Иммунохроматографический тест обычно выявляет антиген MPT64, секретируемый жизнеспособными микобактериями комплекса; при низкой концентрации возбудителя, смешанной культуре или недостаточной экспрессии антигена возможен ложноотрицательный результат.
| Метод или признак | Что выявляет | Интерпретация при смешанной культуре |
|---|---|---|
| ПЦР IS6110 | ДНК мишенного элемента комплекса M. tuberculosis | Положительный результат указывает на наличие микобактерий комплекса; неспецифическая флора реакции не препятствует |
| Посев на кровяной агар | Способность сопутствующих бактерий расти на обогащённой среде | Рост возможен при контаминации; отрицательный посев не является обязательным признаком смешанной культуры |
| Жидкая питательная среда | Рост микроорганизмов по изменению прозрачности и другим признакам | Помутнение может быть вызвано неспецифической микрофлорой и не позволяет идентифицировать микобактерии |
| Иммунохроматография MPT64 | Секретируемый белковый антиген жизнеспособных микобактерий комплекса | Отрицательный результат возможен при малом количестве микобактерий или недостаточной продукции антигена |
| Микроскопия по Цилю—Нильсену | Кислотоустойчивые микобактерии | Подтверждает наличие кислотоустойчивых бактерий, но не всегда позволяет отличить комплекс M. tuberculosis от НТМ |
| Идентификация культуры | Видовую принадлежность выделенного возбудителя | Требует сочетания молекулярных, иммунологических и культуральных методов |
Таким образом, в данной ситуации наиболее информативным признаком является амплификация IS6110, поскольку метод непосредственно выявляет генетический материал возбудителя. Положительная ПЦР должна оцениваться вместе с клиническими данными, микроскопией и результатами культурального исследования. При выявлении контаминации необходимы повторная идентификация изолята и определение лекарственной чувствительности микобактерий.