2) CD45RA (+)
3) CD34
4) CD45R
Наивные Т-лимфоциты преимущественно экспрессируют изоформу CD45RA. Эти клетки уже прошли созревание в тимусе, но еще не встретили специфический антиген и не участвовали в формировании иммунологической памяти. Их типичный иммунофенотип включает CD45RA, CCR7 и CD62L, обеспечивающие миграцию через кровь во вторичные лимфоидные органы, где происходит распознавание антигена, представленного дендритными клетками.
CD45 представляет собой трансмембранную тирозинфосфатазу, кодируемую геном PTPRC. Альтернативный сплайсинг его пре-мРНК приводит к образованию нескольких изоформ с различной структурой внеклеточного домена. При активации наивного Т-лимфоцита и его дифференцировке в клетку памяти обычно происходит снижение экспрессии CD45RA и появление короткой изоформы CD45RO; одновременно изменяется порог передачи сигнала через T-клеточный рецептор.
CD45RO считается характерным маркером большинства антиген-опытных Т-клеток памяти, а CD34 экспрессируется главным образом гемопоэтическими стволовыми и ранними прогениторными клетками и не является вариантом CD45. Обозначение CD45R без уточнения изоформы недостаточно специфично. При проточной цитометрии CD45RA следует оценивать совместно с CCR7, CD62L, CD27, CD28 и CD95, поскольку терминально дифференцированные эффекторные клетки способны повторно экспрессировать CD45RA.
| Популяция Т-клеток | CD45RA | CD45RO | Дополнительные признаки | Функциональная характеристика |
|---|---|---|---|---|
| Наивные Т-клетки | Положительная | Отрицательная или низкая | CCR7+, CD62L+, CD27+, CD28+, CD95−/низкий | Не встречались с соответствующим антигеном; циркулируют преимущественно через лимфоидные органы |
| Т-клетки памяти со свойствами стволовых клеток, TSCM | Положительная | Обычно отрицательная | CCR7+, CD62L+, CD27+, CD28+, CD95+ | Антиген-опытные клетки с высокой способностью к самообновлению и пролиферации |
| Центральные Т-клетки памяти, TCM | Обычно отрицательная | Положительная | CCR7+, CD62L+, CD27+ | Мигрируют в лимфоидные органы и быстро пролиферируют при повторной встрече с антигеном |
| Эффекторные Т-клетки памяти, TEM | Отрицательная | Положительная | CCR7−, CD62L−, вариабельная экспрессия CD27 и CD28 | Локализуются в крови и периферических тканях, быстро реализуют эффекторные функции |
| Терминально дифференцированные эффекторные клетки, TEMRA | Повторно положительная | Обычно отрицательная | CCR7−, CD62L−, часто CD27− и CD28− | Антиген-опытные клетки с выраженной цитотоксической активностью и ограниченным пролиферативным резервом |
| Активированные Т-клетки | Снижается или вариабельна | Часто повышается | CD25+, CD69+, HLA-DR+ в зависимости от стадии активации | Получили сигнал через T-клеточный рецептор и костимулирующие молекулы |
| Гемопоэтические стволовые и ранние прогениторные клетки | Не используется как основной признак | Не используется как основной признак | CD34+, CD45 слабой интенсивности или отрицательный на самых ранних стадиях | Предшественники клеток крови; не относятся к зрелым наивным Т-лимфоцитам |
Таким образом, CD45RA является базовым фенотипическим признаком наивных Т-лимфоцитов, но не абсолютно специфичным маркером их антигенной неопытности. Выявление CD45RA в сочетании с CCR7 и CD62L позволяет отличить наивные клетки от большинства эффекторных и клеток памяти. Для разграничения наивных клеток, TSCM и TEMRA дополнительно исследуют CD95, CD27 и CD28. Комплексная панель маркеров особенно важна при иммуномониторинге, оценке восстановления иммунитета и анализе клеточных продуктов для иммунотерапии.