2) CD138, CD38, CD19, CD20, IgM, CD22, CD56, CD27
3) CD13, CD38, CD19, CD45, CD28
4) CD138, CD38, CD19, CD45, CD27, CD56, CD117, CD81 (+)
Для мониторинга минимальной остаточной болезни (МОБ) при множественной миеломе используется мультипараметрическая проточная цитометрия с выявлением плазматических клеток и их опухолевого иммунного фенотипа. Плазматические клетки идентифицируют прежде всего по яркой экспрессии CD38 и CD138, а сочетание CD19, CD45, CD27, CD56, CD117 и CD81 позволяет отличить клональные клетки миеломы от нормальных плазматических клеток. Именно поэтому указанная комбинация маркеров соответствует международному принципу стандартизированного иммунофенотипирования МОБ.
Для миеломных плазматических клеток характерны вариабельная или сниженная экспрессия CD19, CD27 и CD81, нередко отсутствие либо слабая экспрессия CD45, а также аберрантная экспрессия CD56 и/или CD117. Нормальные плазматические клетки обычно CD19-положительны, CD56-отрицательны, экспрессируют CD27 и CD81 и имеют иной профиль CD45. Оценка проводится не по одному антигену, а по совокупности признаков с подтверждением клональности по внутриклеточной рестрикции лёгких цепей иммуноглобулинов κ/λ; для валидированного метода важны достаточный объём исследованного материала и чувствительность не менее 10−5, предпочтительно до 10−6.
| Маркер или профиль | Диагностическое значение при МОБ |
|---|---|
| CD38bright, CD138+ | Основные маркеры идентификации плазматических клеток; CD38 обычно экспрессируется очень ярко, CD138 подтверждает плазматическую дифференцировку. |
| CD19 | Чаще сохранён на нормальных плазматических клетках и утрачен или снижен при миеломе; результат интерпретируют в составе общего фенотипа. |
| CD45 | Экспрессия на опухолевых плазматических клетках вариабельна или снижена, что помогает отличать их от части нормальных плазматических клеток. |
| CD56 | Аберрантная экспрессия характерна для многих миеломных клонов, но может отсутствовать, поэтому отрицательный CD56 не исключает МОБ. |
| CD117 | Аберрантный маркер, выявляемый у части клонов; повышает специфичность фенотипирования при сочетании с другими антигенами. |
| CD27 и CD81 | Снижение или отсутствие экспрессии поддерживает патологический фенотип плазматических клеток по сравнению с нормальными клетками. |
| Внутриклеточные κ/λ | Подтверждают моноклональность плазматических клеток и позволяют отличить остаточный опухолевый клон от реактивных плазматических клеток. |
Выявление МОБ требует анализа всего фенотипического профиля, поскольку экспрессия отдельных антигенов может изменяться после лечения и различаться между пациентами. Положительный результат означает обнаружение плазматических клеток с аберрантным иммунным фенотипом и признаками клональности, а не просто наличие CD138-положительных клеток. Отрицательный результат имеет клиническую ценность только при соблюдении требований к качеству образца, числу исследованных клеток и аналитической чувствительности метода.