2) CD45
3) CD7
4) CD19 (+)
CD19 — мембранный маркер В-клеточной дифференцировки, входящий в корецепторный комплекс с CD21 и CD81 и усиливающий сигнал через В-клеточный рецептор. Нормальные NK-клетки относятся к врождённому цитотоксическому лимфоидному ряду и не имеют В-клеточного рецепторного комплекса, поэтому CD19 на их поверхности не определяется. Напротив, для NK-клеток характерен фенотип CD45+CD56+CD7+, обычно при отсутствии поверхностного CD3.
CD45 является общим лейкоцитарным антигеном и экспрессируется на NK-клетках; CD7 — типичный маркер Т- и NK-клеток. CD56 (NCAM) выявляется на большинстве NK-клеток, причём интенсивность его экспрессии позволяет условно выделять CD56dim-популяцию с преимущественно цитотоксической активностью и CD56bright-популяцию, продуцирующую большое количество цитокинов. Поэтому отсутствие CD19 является признаком, который наиболее непосредственно исключает В-клеточную принадлежность.
В проточной цитометрии NK-клетки обычно идентифицируют как CD45brightCD56+CD3−, часто CD16+ и CD19−. Обнаружение CD19 при предполагаемой NK-популяции требует проверки гейтинга и исключения двойных клеточных событий, примеси В-лимфоцитов или необычного иммунophenотипа опухолевых клеток.
| Маркер | Экспрессия на NK-клетках | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| CD45 | Положительная, обычно яркая | Подтверждает принадлежность к лейкоцитарному пулу; используется при первичном гейтинге лимфоцитов. |
| CD56 | Положительная; возможны варианты CD56dim и CD56bright | Основной маркер NK-клеточной линии в сочетании с отсутствием поверхностного CD3. |
| CD7 | Чаще положительная | Поддерживает принадлежность к Т/NK-клеточной линии, но сам по себе не является специфичным для NK-клеток. |
| CD3 | Поверхностный CD3 отсутствует | Позволяет отличить NK-клетки от цитотоксических Т-лимфоцитов; цитоплазматический CD3ε при этом может выявляться. |
| CD16 | Часто положительная, особенно у CD56dim-клеток | Связан с антителозависимой клеточной цитотоксичностью и является дополнительным NK-маркером. |
| CD19 | В норме отрицательная | Маркер В-клеточной линии; его наличие нехарактерно для нормальных NK-клеток. |
| CD20 | В норме отрицательная | Дополнительно помогает исключить зрелую В-клеточную популяцию при дифференциальной диагностике. |
Таким образом, CD19 не относится к иммунophenотипу нормальных NK-клеток, поскольку отражает В-клеточную, а не NK-клеточную дифференцировку. Основная функция NK-клеток обеспечивается балансом активирующих и ингибирующих рецепторов, а не передачей сигнала через BCR-комплекс. В практической диагностике оценка CD19 должна проводиться вместе с CD3, CD56, CD16, CD7 и CD45, а не изолированно. Такое сочетание маркеров позволяет отличить NK-клетки от В-лимфоцитов и CD3-положительных цитотоксических Т-клеток.