2) лейкоредукция
3) замораживание
4) отмывание
Для концентрата гранулоцитов стандартной манипуляцией является гамма- или рентгеновское облучение. Гранулоцитарный компонент содержит значительное количество жизнеспособных донорских Т-лимфоцитов, способных пролиферировать в организме реципиента. Ионизирующее излучение повреждает их способность к делению и тем самым предотвращает трансфузионно-ассоциированную реакцию трансплантат против хозяина (ТА-GVHD) — тяжелое осложнение с лихорадкой, кожной сыпью, поражением печени, диареей и выраженной аплазией костного мозга.
Облучение выполняют в валидированном диапазоне доз, обычно не менее 25 Гр и не более 50 Гр, с учетом действующих нормативов. Лейкоредукция для гранулоцитов не является обычной процедурой, поскольку удаление лейкоцитов противоречит лечебной цели трансфузии; кроме того, она не считается надежной заменой облучению для профилактики ТА-GVHD. Замораживание резко ухудшает сохранность и функциональную активность гранулоцитов, а отмывание применяется только по специальным показаниям и сопровождается потерей клеточного выхода.
| Манипуляция | Основная цель | Применение к концентрату гранулоцитов |
|---|---|---|
| Облучение | Инактивация пролиферирующих донорских Т-лимфоцитов | Обычная обязательная обработка для профилактики ТА-GVHD |
| Лейкоредукция | Снижение количества лейкоцитов и риска аллоиммунизации, фебрильных реакций | Не применяется рутинно, так как гранулоциты являются лечебным клеточным компонентом |
| Замораживание | Длительное хранение клеточного материала | Не используется обычно: приводит к снижению жизнеспособности и хемотаксической активности гранулоцитов |
| Отмывание | Удаление белков плазмы, остаточных антител и растворимых медиаторов | Только по специальным показаниям, например при тяжелых реакциях на плазменные белки |
| Кратковременное хранение | Сохранение функциональной активности клеток | Ограничено; компонент хранят недолго при контролируемой температуре и обычно переливают как можно скорее |
| Патогенредукция | Инактивация инфекционных агентов | Не заменяет облучение и не является универсальным методом для гранулоцитарных компонентов |
Облученный компонент сохраняет возможность выполнять основную функцию — доставлять активные гранулоциты в очаг тяжелой инфекции или нейтропении. Особое значение облучение имеет при иммунодефицитах, внутриутробных и неонатальных трансфузиях, трансплантации гемопоэтических клеток, HLA-совместимых или направленных донациях. Лейкоредукция снижает число лейкоцитов, но не обеспечивает достаточной профилактики ТА-GVHD, поэтому не заменяет радиационную инактивацию Т-лимфоцитов.