2) некоторое время сохраняются эритроциты с частичной потерей гликозилфосфатидилинозитола при отсутствии ПНГ-клона среди лейкоцитов (+)
3) выявляются только эритроциты с полной потерей гликозилфосфатидилинозитола
4) сохраняется ПНГ-клон среди как эритроцитов, так и лейкоцитов
При успешной аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток патологический ПНГ-клон в костном мозге замещается донорским кроветворением. Поэтому донорские лейкоциты, прежде всего нейтрофилы и моноциты, не имеют соматической мутации PIGA и экспрессируют нормальные GPI-якорные белки; при проточной цитометрии ПНГ-клон среди лейкоцитов не определяется. Однако эритроциты, образованные до трансплантации, продолжают циркулировать в периферической крови в течение ограниченного времени.
ПНГ-эритроциты II типа характеризуются частичным дефицитом GPI-якорных белков CD55 и CD59, поэтому их продолжительность жизни снижена, но обычно больше, чем у клеток III типа с полной утратой этих белков. Вследствие этого после восстановления донорского кроветворения некоторое время могут обнаруживаться эритроциты с частичной потерей GPI при отсутствии ПНГ-клона среди лейкоцитов. Постепенное исчезновение таких эритроцитов при последующем наблюдении отражает их естественное удаление и замену клетками донорского происхождения, а не сохранение патологического клона в костном мозге.
| Клеточная популяция или состояние | GPI-якорные белки | Диагностическое и клиническое значение |
|---|---|---|
| Нормальные клетки | Сохранены; FLAER связывается с клеточной мембраной | Признак нормального донорского или собственного кроветворения |
| Эритроциты ПНГ II типа | Частичный дефицит CD55/CD59 и других GPI-якорных белков | Могут временно сохраняться после трансплантации; гемолиз выражен умереннее |
| Эритроциты ПНГ III типа | Полная утрата GPI-якорных белков | Наиболее чувствительны к комплементу, имеют короткую продолжительность жизни и быстрее исчезают |
| ПНГ-лейкоциты до трансплантации | Дефицит GPI-якорных белков; FLAER-негативность гранулоцитов и моноцитов | Отражают наличие патологического клона в кроветворной ткани |
| Донорские лейкоциты после приживления трансплантата | Экспрессия CD55/CD59 сохранена, FLAER-позитивность | Отсутствие ПНГ-клона подтверждает восстановление донорского кроветворения |
| Оценка эритроцитов после трансплантации | Возможна временная примесь GPI-дефицитных клеток реципиента | Результат следует интерпретировать с учетом срока после трансплантации и переливаний эритроцитов |
| Основной метод выявления ПНГ-клона | Многоцветная проточная цитометрия с FLAER и антителами к CD24/CD66b, CD14 и CD15 | Наиболее информативна для анализа гранулоцитов и моноцитов, поскольку эти клетки быстрее отражают состав донорского кроветворения |
Таким образом, временное обнаружение аномальных эритроцитов после трансплантации не противоречит успешному приживлению трансплантата. Ключевым признаком эрадикации ПНГ-клона служит его отсутствие в лейкоцитарных популяциях при подтвержденном донорском химеризме. Динамическое исследование крови позволяет отличить остаточные эритроциты реципиента от продолжающегося патологического кроветворения. Сохранение или нарастание ПНГ-клона в лейкоцитах, напротив, требовало бы исключения неполного приживления либо рецидива клона.