2) тонкослойная хроматография (+)
3) определение активности ферментов в эритроцитах
4) тандемная масс-спектрометрия
Нарушения обмена органических кислот обусловлены дефектами ферментов катаболизма аминокислот, жирных кислот или углеводов, вследствие чего в организме и моче накапливаются промежуточные метаболиты. Тонкослойная хроматография позволяет разделить органические кислоты на сорбенте по различиям в полярности и адсорбции, после чего выявить их по положению пятен относительно стандартов. Диагностически значимым является характерный профиль метаболитов или появление аномальных пятен в моче, особенно при наличии метаболического ацидоза, кетонурии, гипераммониемии, рвоты, судорог и угнетения сознания.
В рамках представленной тестовой классификации тонкослойная хроматография рассматривается как метод подтверждения органической ацидурии по качественному спектру выделяемых соединений. Активность ферментов в эритроцитах применима только при подозрении на конкретный ферментопатический дефект и не выявляет весь спектр органических кислот. Тандемная масс-спектрометрия преимущественно используется для массового неонатального скрининга по профилю ацилкарнитинов, а газовая хроматография, особенно в сочетании с масс-спектрометрией, в современной практике обеспечивает более детальное количественное подтверждение и идентификацию метаболитов.
| Метод | Исследуемый материал | Основной диагностический признак | Роль при органических ацидуриях | Ограничения |
|---|---|---|---|---|
| Тонкослойная хроматография | Моча | Аномальный профиль пятен и совпадение их положения со стандартами органических кислот | Качественное выявление патологической экскреции; в учебной схеме — подтверждение нарушения | Ограниченная чувствительность и невозможность точного количественного анализа |
| Газовая хроматография | Моча, после экстракции и дериватизации | Хроматографический профиль летучих производных органических кислот | Детальная идентификация и количественная оценка метаболитов; часто выполняется в формате GC-MS | Требует сложной пробоподготовки и специализированного оборудования |
| Тандемная масс-спектрометрия | Высушенное пятно крови | Изменение соотношения ацилкарнитинов | Высокопроизводительный неонатальный скрининг органических ацидурий и дефектов окисления жирных кислот | Аномальный результат нуждается в подтверждении исследованием мочи и молекулярно-генетическим анализом |
| Определение активности ферментов | Эритроциты, лейкоциты или культура фибробластов | Снижение активности конкретного фермента | Подтверждение отдельных ферментопатий при известной предполагаемой нозологии | Не является универсальным тестом для всех органических ацидурий |
| Органический ацидоз | Кислотно-основное состояние крови | Снижение pH и бикарбоната, увеличение анионной разницы | Поддерживает наличие метаболической декомпенсации | Не указывает конкретный дефект обмена |
| Патологическая экскреция метаболитов | Моча в период клинической декомпенсации | Повышение концентрации специфических органических кислот и их производных | Связывает клинический эпизод с предполагаемой органической ацидурией | Результат может нормализоваться вне криза или после интенсивной терапии |
Для повышения диагностической ценности мочу желательно исследовать во время метаболического криза и до начала интенсивной инфузионной терапии. Отрицательный результат вне эпизода декомпенсации не исключает наследственное заболевание и может потребовать повторного анализа. Окончательная верификация нередко включает количественное исследование органических кислот методом GC-MS и поиск патогенных вариантов в соответствующем гене.