2) пропуск экзона с нонсенс-мутацией и восстановление рамки считывания (+)
3) встраивание полной кодирующей последовательности ДНК гена
4) ингибирование транскрипции
У препарата аталурен (Translarna) принципиально иной механизм: он способствует рибосомному прочтению преждевременного стоп-кодона (UAA, UAG или UGA), возникшего вследствие нонсенс-мутации в матричной РНК. Это позволяет продолжить трансляцию и синтезировать полноразмерный белок, который может сохранять частичную функциональную активность, например дистрофин при нонсенс-варианте гена DMD.
Формулировка об пропуске экзона не описывает действие аталурена. Пропуск экзона — это механизм антисмысловых олигонуклеотидов, связывающихся с пре-мРНК и изменяющих сплайсинг; он применяется преимущественно для восстановления рамки считывания при определённых делециях или нарушениях сплайсинга. Поэтому отмеченный в задании вариант следует считать некорректным: среди предложенных ответов отсутствует точное описание механизма аталурена, а правильная формулировка должна включать подавление преждевременной терминации трансляции (read-through).
| Подход | Молекулярный механизм | Тип генетического дефекта | Ожидаемый результат |
|---|---|---|---|
| Аталурен | Рибосомное прочтение преждевременного стоп-кодона в мРНК | Нонсенс-мутация, создающая преждевременный стоп-сигнал | Синтез полноразмерного или частично функционального белка |
| Пропуск экзона | Изменение сплайсинга пре-мРНК с удалением определённого экзона | Некоторые делеции и варианты, нарушающие рамку считывания | Восстановление рамки считывания с образованием укороченного белка |
| Коррекция миссенс-варианта | Замена одного нуклеотида или аминокислоты в гене/транскрипте | Миссенс-мутация | Потенциальное восстановление нормальной аминокислотной последовательности |
| Генная заместительная терапия | Доставка функциональной кодирующей последовательности с помощью вектора | Потеря функции гена, включая крупные делеции | Экспрессия терапевтического трансгена |
| Ингибирование транскрипции | Снижение образования первичного РНК-транскрипта | Отдельные состояния, при которых необходимо подавить экспрессию гена | Уменьшение продукции соответствующего белка; восстановления дефектного белка не происходит |
| Молекулярная диагностика | Секвенирование кодирующих областей и анализ варианта | Подтверждённый патогенный нонсенс-вариант в соответствующем гене | Определение возможности терапии, ориентированной на read-through |
Для отбора пациентов необходимо подтвердить нонсенс-мутацию методом молекулярно-генетического исследования и исключить миссенс-, frameshift- и сплайсинговые варианты, на которые аталурен не рассчитан. При нонсенс-мутации преждевременная остановка трансляции приводит к дефициту или укорочению белка, а не к выпадению экзона. Следовательно, в тестовом материале требуется исправить ключ или заменить отмеченный ответ на описание рибосомного read-through преждевременного стоп-кодона.