2) поиск крупных делеций в митохондриальной ДНК
3) поиска частых мутаций в митохондриальной ДНК (+)
4) секвенирования панели ядерных генов
Синдром MERRF (миоклоническая эпилепсия с рваными красными волокнами ) относится к митохондриальным цитопатиям, обусловленным преимущественно точечными вариантами митохондриальной ДНК. Более чем у 80% пациентов с типичным фенотипом выявляется патогенный вариант m.8344A>G в гене MT-TK, кодирующем митохондриальную транспортную РНК лизина. Поэтому первичное таргетное исследование частых вариантов мтДНК обеспечивает наиболее быстрый и экономически обоснованный путь к молекулярному подтверждению диагноза.
Нарушение функции митохондриальной тРНК приводит к дефекту синтеза белков дыхательной цепи, снижению окислительного фосфорилирования и энергетической недостаточности тканей с высокой потребностью в АТФ. Клинически это проявляется сочетанием миоклонуса, генерализованных эпилептических приступов, мозжечковой атаксии и миопатии; при биопсии мышцы могут определяться рваные красные волокна , обусловленные субсарколеммальным накоплением патологически изменённых митохондрий. Выраженность симптомов зависит от уровня гетероплазмии — соотношения мутантной и нормальной мтДНК в конкретной ткани.
| Диагностический подход | Значение при подозрении на MERRF |
|---|---|
| Поиск варианта m.8344A>G в MT-TK | Предпочтительный первый этап, поскольку этот вариант выявляется у большинства пациентов с классическим фенотипом. |
| Расширенный поиск частых вариантов мтДНК | Позволяет обнаружить более редкие варианты, включая m.8356T>C, m.8363G>A и некоторые изменения в MT-TL1. |
| Полное секвенирование мтДНК | Показано при отрицательном таргетном тесте и сохраняющейся высокой клинической вероятности митохондриального заболевания. |
| Исследование другого биоматериала | Буккальный эпителий, мочевой осадок или мышечная ткань исследуются при отрицательном результате анализа крови, поскольку уровень гетероплазмии различается между тканями. |
| Поиск крупных делеций мтДНК | Более характерен для синдрома Кернса — Сейра, синдрома Пирсона и прогрессирующей наружной офтальмоплегии, поэтому не является оптимальным стартовым тестом при типичном MERRF. |
| Панель ядерных генов | Применяется при отсутствии патогенных вариантов мтДНК, атипичном фенотипе или подозрении на ядерно-генетическую причину митохондриальной дисфункции. |
| Секвенирование полного экзома | Используется на последующих этапах при неясном или перекрывающемся фенотипе, когда направленные исследования не дали результата. |
Отрицательный анализ крови на частые варианты мтДНК не исключает MERRF, поскольку доля мутантных митохондрий в лейкоцитах может быть ниже диагностического порога. В такой ситуации необходимо исследовать ткани с более высокой вероятностью сохранения гетероплазмии и расширить молекулярный анализ. Результат генетического тестирования следует сопоставлять с неврологическим фенотипом, данными ЭЭГ, нейровизуализации и лабораторными признаками митохондриальной дисфункции. Подтверждение варианта мтДНК также имеет значение для медико-генетического консультирования с учётом материнского типа наследования.