2) 30 (+)
3) 10
4) 15
Правильный ответ — 30 клеток. При расширенном цитогенетическом анализе исследуют не менее 30 метафазных клеток, поскольку мозаицизм представляет собой наличие двух или более клеточных линий с различным хромосомным набором в одном организме. При анализе ограниченного числа клеток низкопроцентный клон может случайно не попасть в исследуемую выборку, что приведёт к ложноотрицательному результату.
Особое значение это имеет для мозаицизма по половым хромосомам: возможны варианты 45,X/46,XX, 45,X/46,XY, 46,XX/47,XXX, 46,XY/47,XXY и другие сочетания. Увеличение числа анализируемых метафаз повышает вероятность обнаружения аномальной клеточной линии и позволяет точнее определить её долю. Результат формулируют с указанием выявленных клонов, числа исследованных клеток и процентного соотношения клеточных линий в соответствии с правилами ISCN.
Исследование 20 клеток обычно достаточно для стандартного кариотипирования без специального подозрения на мозаицизм, но при вероятности мозаичной формы требуется расширение выборки минимум до 30 клеток. При клиническом несоответствии результату или предположении о малой доле патологического клона применяют дополнительные методы: FISH, исследование клеток из другого биологического материала или молекулярное кариотипирование.
| Метод или подход | Основная задача | Особенности при мозаицизме |
|---|---|---|
| Стандартный кариотип | Оценка числа и структуры хромосом | Обычно анализируют не менее 20 метафаз; может быть недостаточен для выявления малой клеточной линии |
| Расширенный цитогенетический анализ | Поиск низкопроцентного мозаичного клона | Исследуют не менее 30 метафазных клеток при подозрении на мозаицизм, особенно по половым хромосомам |
| Мозаицизм 45,X/46,XX | Выявление клеточных линий с моносомией X и нормальным женским кариотипом | Фенотип варьирует от признаков синдрома Шерешевского—Тернера до практически нормального; выраженность зависит от доли и распределения клонов |
| Мозаицизм 45,X/46,XY | Определение клеточных линий с моносомией X и наличием Y-хромосомы | Требует оценки полового развития и поиска материала Y-хромосомы из-за риска дисгенезии гонад и опухоли гонадобластомы |
| FISH-исследование | Подсчёт большого числа интерфазных ядер с использованием специфических зондов | Повышает вероятность обнаружения малой доли аномальных клеток, но исследует только выбранные хромосомы или локусы |
| Хромосомный микроматричный анализ | Выявление дисбаланса генетического материала по всему геному | Может обнаруживать мозаичные анеуплоидии, однако чувствительность зависит от доли клона; сбалансированные перестройки обычно не выявляет |
| Исследование другого материала | Оценка тканеспецифического мозаицизма | При отрицательном результате в крови исследуют буккальный эпителий, кожу или другие ткани, поскольку распределение клонов между тканями неодинаково |
Отрицательный результат исследования крови не всегда исключает мозаицизм, особенно при его тканеспецифическом распределении. Чем меньше предполагаемая доля патологической клеточной линии, тем большее число клеток и более чувствительный метод необходимы для её подтверждения. Интерпретацию проводят совместно с клиническими признаками, данными пренатальной диагностики и результатами исследований других тканей.