2) фотометрией
3) электрофорезом (+)
4) иммунно-ферментным анализом
Электрофорез является методом разделения белков сыворотки крови по их электрофоретической подвижности в электрическом поле. При заданном значении pH белковые молекулы приобретают определённый заряд и перемещаются через гель или капилляр с разной скоростью, зависящей также от их размера и пространственной структуры. В результате формируются фракции альбумина, α1-, α2-, β- и γ-глобулинов, которые затем оценивают по площади и интенсивности зон.
Сывороточный электрофорез позволяет не только разделить белковые компоненты, но и определить их относительное содержание, выявить диспротеинемию и обнаружить моноклональный компонент — узкую полосу или пик парапротеина, характерный, например, для моноклональных гаммапатий. В рутинной практике применяют электрофорез на агарозном геле или капиллярный электрофорез; для уточнения природы моноклонального белка используют иммунофиксацию.
Титрование не обеспечивает разделения белков на фракции, а отражает кислотно-основные или иные количественные характеристики раствора. Фотометрия может использоваться для определения общей концентрации белка или регистрации интенсивности уже разделённых зон, но сама по себе фракционирование не выполняет. Иммуноферментный анализ предназначен для специфического выявления и количественной оценки определённого антигена или антитела, а не для общего разделения белков сыворотки.
| Фракция или находка | Основные компоненты | Типичные диагностические изменения |
|---|---|---|
| Альбуминовая | Альбумин | Снижается при недостаточном синтезе в печени, потере белка, воспалении и гемодилюции; повышение чаще связано с обезвоживанием. |
| α1-глобулиновая | α1-антитрипсин, α1-кислый гликопротеин | Увеличивается как белок острой фазы; снижение возможно при дефиците α1-антитрипсина. |
| α2-глобулиновая | Гаптоглобин, α2-макроглобулин, церулоплазмин | Повышается при воспалении; выраженное увеличение возможно при нефротическом синдроме. |
| β-глобулиновая | Трансферрин, компоненты комплемента, β-липопротеины | Изменения встречаются при нарушениях обмена железа, воспалении, заболеваниях печени и отдельных моноклональных гаммапатиях. |
| γ-глобулиновая | Иммуноглобулины | Поликлональное увеличение характерно для хронического воспаления и аутоиммунных заболеваний; снижение возможно при иммунодефицитах. |
| Моноклональный компонент | Иммуноглобулин одного клона или его фрагмент | Определяется как узкий пик, чаще в γ- или β-зоне; требует подтверждения иммунофиксацией и оценки свободных лёгких цепей. |
Результат электрофореза интерпретируют с учётом общего содержания белка, клинических данных и референсных интервалов конкретной лаборатории. На выраженность фракционных изменений могут влиять возраст, беременность, инфузионная терапия и обезвоживание. При подозрении на парапротеинемию одного электрофореза недостаточно для окончательной типизации иммуноглобулина. Таким образом, именно электрофоретическое разделение обеспечивает получение белковых фракций сыворотки и их последующую количественную оценку.