2) макроскопический
3) гистохимический
4) иммунологический
Цитогенетический метод является наиболее достоверным при диагностике хромосомных болезней, поскольку непосредственно исследует хромосомный набор клеток. При классическом кариотипировании оценивают число, форму, размеры и структуру хромосом, что позволяет выявлять числовые аномалии — трисомии, моносомии, полиплоидии — и крупные структурные перестройки: делеции, дупликации, инверсии и транслокации. Результат исследования имеет прямое генетическое подтверждение и может использоваться для установления цитогенетического варианта заболевания.
К современным цитогенетическим технологиям относятся также флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) и хромосомный микроматричный анализ. FISH выявляет заданные перестройки или микроделеции, а микроматричный анализ обнаруживает субмикроскопические потери и приобретения участков генома. Макроскопические, гистохимические и иммунологические признаки могут указывать на наличие синдрома или его проявлений, но не позволяют непосредственно определить хромосомный дисбаланс и потому имеют преимущественно ориентировочное либо дополнительное значение.
| Метод | Объект исследования | Выявляемые изменения | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Классическое кариотипирование | Метафазные хромосомы клеток | Числовые аномалии и крупные структурные перестройки | Базовое прямое подтверждение хромосомной болезни |
| FISH | Определённые локусы хромосом в интерфазных или метафазных клетках | Целевые делеции, дупликации, транслокации, анеуплоидии | Быстрая верификация предполагаемой аномалии и оценка мозаицизма |
| Хромосомный микроматричный анализ | Копийный профиль генома | Микроделеции и микродупликации, в том числе субмикроскопические | Высокая разрешающая способность; не выявляет большинство сбалансированных перестроек |
| Макроскопическая оценка | Внешние признаки, фенотип, данные осмотра | Неспецифические проявления синдрома | Формирует клиническое подозрение, но не подтверждает кариотип |
| Гистохимическое исследование | Химический состав и распределение веществ в тканях | Изменения метаболитов, ферментов и тканевых структур | Дополняет диагностику, но не определяет хромосомный набор |
| Иммунологическое исследование | Антигены, антитела и иммунные реакции | Белковые маркеры и функциональные последствия генетического дефекта | Может уточнять синдром или осложнения, но является косвенным методом |
Выбор конкретной цитогенетической технологии зависит от предполагаемого диагноза, размера изменения и необходимости оценки мозаицизма. Нормальный результат стандартного кариотипирования не исключает микроделецию или микродупликацию, поэтому при неясном фенотипе применяют микроматричный анализ или таргетное FISH-исследование. Для окончательной интерпретации результаты сопоставляют с клиническими данными, семейным анамнезом и, при необходимости, молекулярно-генетическим исследованием.