2) по Цилю – Нильсену
3) по Граму и метиленовым синим
4) фуксином Пфейфера и генциан-виолетом
Окраска по Романовскому–Гимзе является полихромным методом, позволяющим дифференцированно выявлять ядро, цитоплазму и тонкие органеллы простейших. После фиксации мазка ядерный хроматин приобретает красно-фиолетовые оттенки, цитоплазма — голубовато-синие, благодаря чему контуры трофозоита и связанные с его поверхностью структуры становятся более различимыми. Метод применим для морфологического подтверждения трихомонад в препаратах биологического материала.
Диагностической стадией Trichomonas vaginalis является только трофозоит — грушевидная или округлая клетка размером примерно 7–30 мкм. У паразита имеются четыре свободных передних жгутика и пятый жгутик, проходящий вдоль края ундулирующей мембраны; также определяется продольный аксостиль. Выявление совокупности этих признаков позволяет отличить трихомонаду от эпителиальных клеток, лейкоцитов, дрожжевых грибов и клеточного детрита.
В нативном препарате основным признаком служит характерная толчкообразная подвижность, обусловленная работой жгутиков и волнообразными движениями ундулирующей мембраны, однако исследование необходимо проводить вскоре после получения материала. В фиксированном мазке движения оценить невозможно, поэтому окраска по Романовскому–Гимзе используется для изучения сохранённых морфологических структур. Остальные перечисленные методы предназначены преимущественно для выявления бактерий, кислотоустойчивых микроорганизмов или общей клеточной морфологии и не обеспечивают оптимальной визуализации тонкого строения трихомонад.
| Метод исследования | Основное назначение | Диагностическое значение при трихомониазе |
|---|---|---|
| Окраска по Романовскому–Гимзе | Дифференциальное окрашивание ядра, цитоплазмы и структур простейших | Позволяет оценить форму трофозоита, ядро, жгутики, ундулирующую мембрану и аксостиль |
| Нативная микроскопия | Исследование свежего материала без фиксации | Выявляет живые трофозоиты по характерной толчкообразной и волнообразной подвижности |
| Окраска по Граму | Дифференциация грамположительных и грамотрицательных бактерий | Полезна для оценки бактериальной микрофлоры, но тонкие органеллы трихомонад визуализирует недостаточно |
| Метиленовый синий | Простое контрастирование клеток и ядерного материала | Может подчеркнуть общие контуры клеток, но не является предпочтительным методом выявления жгутиков |
| Окраска по Цилю–Нильсену | Обнаружение кислотоустойчивых микроорганизмов | Используется прежде всего для микобактерий и некоторых кокцидий, а не для трихомонад |
| Фуксин и генциан-виолет | Контрастирование бактериальных клеток в специальных бактериологических методиках | Не обеспечивает специфического выявления ундулирующей мембраны и жгутикового аппарата |
Микроскопическое обнаружение типичных трофозоитов подтверждает наличие возбудителя, но чувствительность метода зависит от количества паразитов, качества материала и сроков его исследования. Отрицательный результат нативной или окрашенной микроскопии не исключает инфекцию. При низкой паразитарной нагрузке более чувствительными являются культуральные методы и тесты амплификации нуклеиновых кислот. При интерпретации препарата морфологические признаки необходимо оценивать комплексно, не основывая заключение на одной отдельно различимой структуре.